Pour usage diagnostique in vitro et professionnel uniquement.
Nom
Kit de test ELISA Anti-Ct IgG (Sérum/Plasma)
UTILISATION PRÉVUE
Ce kit est une détection qualitative d'anticorps IgG anti-Chlamydia trachomatis (Ct) dans le sérum/plasma humain. Le kit est
adapté au dépistage clinique et au diagnostic de l'infection à Ct dans le sérum/plasma.
PRINCIPE DU TEST
L'antigène Ct est absorbé en phase solide sur la microplaque de réaction en polystyrène. S'il y a des anticorps IgG anti-Ct
dans l'échantillon testé, ils se lient à l'antigène Ct enduit dans la microplaque, forment un complexe antigène-anticorps, puis
se lient à l'anticorps anti-marqué par une enzyme et forment un complexe antigène-anticorps-anticorps à la surface
de la microplaque, et affichent une couleur bleue dans le puits correspondant grâce à l'action du substrat. Par conséquent, il
peut détecter spécifiquement les IgG anti-Ct dans le sérum/plasma humain.
PROCÉDURE DE TEST
1. Équilibrer tous les réactifs à température ambiante pendant 15 minutes avant utilisation.
2. Diluer le tampon de lavage au taux de dilution de 1:40 avec de l'eau distillée avant utilisation.
3. Ajouter 100 µL de diluant d'échantillon dans le puits correspondant (Ne pas ajouter dans le puits blanc, les puits de contrôle négatif et le puits de contrôle positif). L'échantillon doit correspondre au nombre de microplaques.
plaques, chaque plaque doit être fournie avec 2 puits de contrôle négatif, 1 puits de contrôle positif et 1 puits de contrôle blanc.
Ajouter 5 µL d'échantillon dans le puits correspondant, mélanger soigneusement à l'aide de la pipette, ajouter
50 µL de contrôle négatif et de contrôle positif dans les puits de contrôle négatif et le puits de contrôle positif (Ne pas
ajouter dans le puits blanc).
Remarque : Utiliser une pointe de pipette jetable séparée pour chaque spécimen, contrôle négatif et contrôle positif afin
d'éviter la contamination croisée.
4. Agiter doucement pour mélanger pendant 30 secondes. Incuber à 37°C pendant 20 minutes avec la membrane d'étanchéité de la plaque
scellant la plaque.
5. À la fin de l'incubation, retirer et jeter le couvercle de la plaque. Retirer, ajouter le tampon de lavage dans
chaque puits pendant 20 secondes. Répéter 5 fois. Après le dernier cycle de lavage, retourner la plaque sur
du papier absorbant ou une serviette propre, et la tapoter pour éliminer tout résidu.
6. Ajouter respectivement 50 µL de conjugué enzymatique (Ne pas ajouter dans le puits blanc)
7. Incuber à 37°C pendant 20 minutes avec la membrane d'étanchéité de la plaque scellant la plaque. Répéter l'étape de lavage
pendant 5 fois comme à l'étape 5.
8. Ajouter 50 µL de substrat A et 50 µL de substrat B (Ne pas ajouter dans le puits blanc). Incuber à 37°C pendant
10 minutes avec la membrane d'étanchéité de la plaque scellant la plaque.
9. Ajouter 50 µL de solution d'arrêt dans chaque puits (Ne pas ajouter dans le puits blanc). Mélanger doucement en agitant, lire
l'absorbance dans les 10 minutes suivant l'arrêt de la réaction. Calibrer le lecteur de plaque avec le puits blanc
et lire l'absorbance à 450 nm. Si un instrument à double filtre est utilisé, régler la longueur d'onde de référence
à 630 nm. Aucun puits blanc n'est autorisé si une double longueur d'onde est utilisée pour la détection. Calculer la
valeur seuil et évaluer les résultats.
INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS
Chronologie : Lire la densité optique (DO) de l'échantillon à 450 nm avec un lecteur de microplaques.
La DO moyenne du contrôle négatif ≤ 0,1 et la DO moyenne du contrôle positif ≥ 0,8, le test est valide,
sinon le test est invalide.
Valeur seuil (C.O.) = DO moyenne du contrôle négatif x 3 (Calculée à 0,10 lorsque la DO moyenne du contrôle négatif est
< 0,10, calculée à la valeur réelle lorsque la DO moyenne du contrôle négatif
est > 0,10)Résultats positifs : DO de l'échantillon ≥ C.O.
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