Anti virus humain d'immunodéficit d'HIV 1&2 Elisa Test Kit For Human

3. PROCÉDURE D'ANALYSE

• Permettez à tous les composants d'atteindre la température ambiante avant emploi. 1h20 de tampon de lavage concentré Dilute avec ddH2O.
• Réglé deux trois négatifs contrôles de positif et. Distribuez 100μl de contrôle positif (HIV-1 et HIV-2) aussi bien que de contrôle négatif en double dans les puits respectifs sans diluant témoin. Réglé un en blanc bien comme contrôle de fond sans ajouter tout liquide. Ajoutez 50μl de diluant témoin dans chaque essai bien, ajoutez le sérum d'essai de 50 μl ou le plasma dans des puits d'essai se mélangent complètement.
• Placez le plat de microtitre dans une boîte humidifiée et incubez à 37°C pendant 30 mn.
• Jetez la solution de réaction et ajoutez le tampon de lavage dilué par 350μl à chaque puits. Jetez le tampon de lavage après le trempage pour 15-30seconds. Répétez de lavage 5 fois et inverser alors le plat la procédure vigoureusement pour obtenir toute l'eau et blocage de la jante des puits sur le papier absorbant pendant quelques secondes.
• Ajoutez 100μl de conjugué d'enzymes à chaque puits. Mélangez-le doucement en tourbillonnant le plat de microtitre sur le banc plat pendant 1 mn. N'ajoutez pas le conjugué d'enzymes au puits vide.
• Placez le plat de microtitre dans une boîte humidifiée et incubez à 37°C pendant 30 mn.
• Lavez chacun bien 5 fois en remplissant chaque puits de tampon dilué du lavage 1X, puis en inversant le plat vigoureusement pour obtenir toute l'eau et en bloquant la jante des puits sur le papier absorbant pendant quelques secondes.
• Ajoutez 50μl de la solution A (substrat de substrat de HRP) à chaque puits, puis ajoutez 50μl de la solution B (TMB) de substrat à chaque puits. Mélangez doucement et incubez à 37°C for15 mn.
• Ajoutez une goutte (50μl) de solution d'arrêt à chaque puits pour arrêter la coloration.
• Lisez la valeur d'OD à 450 nm/630 nanomètre avec le double lecteur de plat de filtre. C'est option pour lire la valeur d'OD à 450 nanomètre avec le lecteur simple de plat de filtre. (utilisant la valeur d'OD du puits vide pour corriger toute la lecture d'OD de tous les puits