PCs du kit 96 d'essai d'hormone de la bande d'essai de main gauche d'Elisa ISO13485 Luteinizing

Main gauche Elisa Kit Luteinizing Hormone

1. Utilisation prévue

Immunoessai pour la détermination quantitative in vitro de l'hormone luteinizing en sérum humain.

2. Résumé

• La main gauche (hormone luteinizing), ainsi que FSH (hormone de stimulation de follicule), appartient à la famille de gonadotropin. La main gauche et les FSH règlent et stimuler la croissance et la fonction des gonades (des ovaires et des testicules) synergiquement. Comme FSH, TSH et hCG, main gauche est une glycoprotéine se composant de deux sous-unités (α- et β-chaînes). (1, 2, 3) ce proteohormone, qui se compose de 121 acides aminés et de trois chaînes de sucre, a un poids moléculaire de 29500 daltons. Chez les femmes, les gonadotropins agissent dans le circuit de réglementation de hypothalamus-pituitaire-ovaire de commander le cycle menstruel.
• La main gauche et les FSH sont libérés dans les impulsions des cellules gonadotropic du pituitaire antérieur et du passage par l'intermédiaire de la circulation sanguine aux ovaires. Ici les gonadotropins stimulent la croissance et la maturation de la follicule et par conséquent de la biosynthèse des oestrogènes et des progestérones. Les Main-concentrations les plus élevées se produisent pendant la crête de mi-cycle et induisent l'ovulation et la formation du luteum de corpus, le produit principal de sécrétion dont est la progestérone. Dans les cellules de Leydig des testicules, la main gauche stimule la production de la testostérone. La détermination de la concentration de main gauche est employée dans l'élucidation des dysfonctionnements dans le système de hypothalamus-pituitaire-gonades. La détermination de la main gauche en même temps que FSH est utilisée pour les indications suivantes : maladies congénitales avec des aberrations de chromosome (par exemple le syndrome de Turner), des ovaires polycystic (PCO), clarifiant les causes de l'aménorrhée, le syndrome ménopausique, et l'insuffisance suspectée de cellules de Leydig. (1, 4, 5)

3. Principe d'essai

Principe de sandwich. Durée totale d'analyse : 80 minutes.

• L'échantillon, Anti-main gauche a enduit des microwells et l'Anti-main gauche marquée par enzyme sont combinées.

• Pendant l'incubation, on laisse la main gauche présente dans l'échantillon réagir

simultanément avec des deux anticorps, ayant pour résultat les molécules de main gauche étant

serré entre la phase solide et les anticorps enzyme-liés.

• Après le lavage, un complexe est produit entre la phase solide, la main gauche dans l'échantillon et les anticorps enzyme-liés par des réactions immunologiques.

• La solution de substrat est alors ajoutée et catalysée par ce complexe, ayant pour résultat une réaction chromogène. La réaction chromogène en résultant est mesurée comme absorbance.

• L'absorbance est proportionnelle à la quantité de main gauche dans l'échantillon.

Réactifs

Matériaux fournis

• Microplate enduit, 8 X12 bandes, 96 puits, enduits d'un préenduisage avec la souris monoclonale

ANTI-main gauche.

• Calibreurs, 6 fioles, 1 ml chacun, prêtes à employer ; Concentrations : 0 (A), 5 (B), 20 (C), 50 (D), 100 (E) et 200 (F) mIU/mL.

• Le conjugué d'enzymes, 1 fiole, 11 ml de HRP (peroxydase de raifort) a marqué la souris Anti-main gauche monoclonale dans le tampon Tris-NaCl contenant BSA (albumine de sérum de boeuf). Contient 0,1% agents de conservation ProClin300.

• Substrat, 1 fiole, 11ml, prêt à employer, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Arrêtez la solution, 1 fiole, 6,0 ml de 1 mole/l d'acide sulfurique.

• Concentré de solution de lavage, 1 fiole, 25 ml (40X s'est concentré), PBS-tween

solution de lavage.

• IFU, 1 copie.

• Couvercle de plat : 1 morceau.

Matériaux exigés (mais non fourni)

• Lecteur de Microplate avec la capacité absorbante de la longueur d'onde 450nm et 620nm.

• Joint de Microplate.

• Incubateur

4. Procédure d'essais

• Employez seulement le nombre de puits requis et composez les puits des microplates pour

chaque calibreur et échantillon à analyser.

• Ajoutez le μL 25 des calibreurs ou des échantillons à chaque puits.

• Ajoutez le μL 100 du conjugué d'enzymes à chaque puits.

• Secouez le microplate doucement pendant 30 secondes pour se mélanger.

• Couvrez le plat de couvercle de plat et incubez au °C 37 pendant 60 minutes.

• Jetez le contenu du plat micro par la décantation ou l'aspiration. Si

en décantant, tapez et épongez le sec de plat avec le papier absorbant.

• Ajoutez le μL 350 de la solution de lavage, le décantez (robinet et tache) ou l'aspirez. Répétez 4 fois supplémentaires pour un total de 5 lavages. Un joint automatisé de bande de microplate peut être employé. À la fin du lavage, inversez le plat et tapez n'importe quelle solution résiduelle de lavage sur le papier absorbant.

• Ajoutez le μL 100 du substrat à chaque puits.

• Incubez à la température ambiante (18-25℃) dans l'obscurité pour la réaction pendant 20 minutes. Ne secouez pas le plat après addition de sous-état.

• Ajoutez le μl 50 de la solution d'arrêt à chaque puits.

• Secouez pendant 15-20 secondes pour mélanger le liquide dans les puits. C'est important pour

assurez-vous que les changements de couleur bleus pour jaunir complètement.

• Lisez l'absorbance de chaque puits à 450 nanomètre (utilisant 620 à 630 nanomètre en tant que

longueur d'onde de référence pour réduire au minimum des imperfections bonnes) dans un lecteur micro de plat.