1- Calculer le nombre de puits de micro-ondes souhaité.
sacs en plastique recouvertables, scellés et conservés à 2 à 8 °C pour une utilisation ultérieure.
2. Ajouter des calibrateurs et des échantillons:
21 Puits vide: n'ajoutez pas de réactifs.
2. 2 Puits d'étalonnage: ajouter 100 μL d'étalonnage dans les puits de contrôle désignés.
2.3 Puits d'essai: ajouter 100 UL de diluant d'échantillon aux puits d'essai, puis ajouter 10 UL d'échantillon dans le puits correspondant.
2.4 Agiter doucement la plaque pendant 20 secondes, puis couvrir la plaque avec le scellant.
3Incubation: incuber la plaque à 37°C pendant 30 minutes.
4. Étape de lavage (peut être effectuée manuellement ou avec lavage automatisé):
Laver manuellement: retirer soigneusement le mélange d'incubation en jetant la solution dans un récipient de déchets.
bien avec 350 μl de tampon de lavage dilué et agiter doucement pendant 20 à 30 secondes.
Après avoir terminé la dernière étape du lavage, appuyez sur la plaque sur du papier absorbant pour éliminer le liquide résiduel.
Le lavage automatique: le lave-vaisselle automatique doit être calibré pour assurer un lavage efficace.
diluer le tampon de lavage et faire tremper pendant 20 à 30 secondes aspirer complètement tous les puits, répéter 4 fois.
5. Conjugat: ajouter 100 μL de conjugué dans chaque puits sauf le puits vide.
6Incubation: couvrir les puits et incuber à 37°C pendant 30 minutes.
7. Étape de lavage: laver la plaque 5 fois comme décrit à l'étape 4.
8Substrate: ajouter 50 μL de Substrate A et 50 μL de Substrate B dans chaque puits, y compris le puits à vide.
Les micro-ouilles pendant 20 secondes, incubées à 37°C dans le noir pendant 15 minutes.
9. Solution d'arrêt: ajouter 50 μL de solution d'arrêt à chaque puits. Une couleur jaune devrait se développer dans les puits contenant des spécimens positifs.
10. Lire les résultats: lecture à 450/630-700 nm en 30 minutes.
1. Note: la microplate peut également être lue à 450 nm, mais il est fortement recommandé de la lire à 450/630-700 nm pour
de meilleurs résultats.
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