Pour usage diagnostique in vitro et professionnel uniquement.

Kit de test ELISA Anti-Ct IgG (Sérum/Plasma)

Ce kit est une détection qualitative des anticorps IgG de Chlamydia trachomatis (Ct) dans le sérum/plasma humain. Le kit est adapté au dépistage clinique et au diagnostic de l'infection à Ct dans le sérum/plasma.

L'antigène Ct est absorbé en phase solide sur la microplaque de réaction en polystyrène. S'il y a des anticorps IgG anti-Ct dans l'échantillon de test, ils se lient à l'antigène Ct enduit dans la microplaque, forment un complexe antigène-anticorps, puis se lient à l'anticorps marqué par une enzyme et forment un complexe antigène-anticorps-anticorps à la surface de la microplaque, et affichent une couleur bleue dans le puits correspondant grâce à l'action du substrat. Par conséquent, il peut détecter spécifiquement les IgG anti-Ct dans le sérum/plasma humain.

1. Équilibrer tous les réactifs à température ambiante pendant 15 minutes avant utilisation.

2. Diluer le tampon de lavage au taux de dilution de 1:40 avec de l'eau distillée avant utilisation.

3. Ajouter 100 µL de diluant d'échantillon dans le puits correspondant (Ne pas ajouter dans le puits blanc, les puits de contrôle négatif et le puits de contrôle positif). L'échantillon doit correspondre au nombre de puits de la microplaque, chaque plaque doit être fournie avec 2 puits de contrôle négatif, 1 puits de contrôle positif et 1 puits de contrôle blanc. Ajouter 5 µL d'échantillon dans le puits correspondant, mélanger soigneusement à l'aide de la pipette, ajouter 50 µL de contrôle négatif et de contrôle positif dans les puits de contrôle négatif et le puits de contrôle positif (Ne pas ajouter dans le puits blanc).

Remarque : Utiliser une pointe de pipette jetable séparée pour chaque spécimen, contrôle négatif et contrôle positif afin d'éviter la contamination croisée.

4. Agiter doucement pour mélanger pendant 30 secondes. Incuber à 37°C pendant 20 minutes avec la membrane d'étanchéité de la plaque scellant la plaque.

5. À la fin de l'incubation, retirer et jeter le couvercle de la plaque. Retirer, ajouter du tampon de lavage dans chaque puits pendant 20 secondes. Répéter 5 fois. Après le dernier cycle de lavage, retourner la plaque sur du papier absorbant ou une serviette propre, et la tapoter pour éliminer tout résidu.

6. Ajouter respectivement 50 µL de conjugué enzymatique (Ne pas ajouter dans le puits blanc)

7. Incuber à 37°C pendant 20 minutes avec la membrane d'étanchéité de la plaque scellant la plaque. Répéter l'étape de lavage pendant 5 fois comme à l'étape 5.

8. Ajouter 50 µL de substrat A et 50 µL de substrat B (Ne pas ajouter dans le puits blanc). Incuber à 37°C pendant 10 minutes avec la membrane d'étanchéité de la plaque scellant la plaque.

9. Ajouter 50 µL de solution d'arrêt dans chaque puits (Ne pas ajouter dans le puits blanc). Mélanger doucement en agitant, lire l'absorbance dans les 10 minutes suivant l'arrêt de la réaction. Calibrer le lecteur de plaque avec le puits blanc et lire l'absorbance à 450 nm. Si un instrument à double filtre est utilisé, régler la longueur d'onde de référence à 630 nm. Il n'est pas permis d'utiliser de puits blanc si une double longueur d'onde est utilisée pour la détection. Calculer la valeur de seuil et évaluer les résultats.

Chronométrie : Lire la densité optique (DO) de l'échantillon à 450 nm avec un lecteur de microplaques.

La DO moyenne du contrôle négatif ≤ 0,1 et la DO moyenne du contrôle positif ≥ 0,8, le test est valide, sinon le test est invalide.

Résultats positifs : Valeur de DO de l'échantillon ≥ C.O.