Uniquement à des fins de diagnostic in vitro et d' utilisation professionnelle.
Nom
Le test de dépistage des IgG anti-Ct ELISA (sérum/plasma)
Utilisation prévue
Ce kit est une détection qualitative du sérum/plasma humain d' IgG de Chlamydia trachomatis (Ct).
adapté au dépistage clinique et au diagnostic de l'infection par les TC dans le sérum/plasma.
Principe de l'essai
L'antigène Ct est absorbé en phase solide par la microplate de réaction du polystyrène.
dans l'échantillon d'essai, il se lie à l'antigène Ct recouvert de microplate, forme un complexe antigène-anticorps, puis
se lie à l'enzyme appelée anticorps et forme un complexe antigène-anticorps-anticorps à la surface
Il s'agit d'un composé qui a été créé par l'intermédiaire d'un microplate, et affiche une couleur bleue dans le puits correspondant par l'action du substrat.
peut détecter spécifiquement l' IgG Ct dans le sérum/ plasma humain.
Procédure d'essai
1Équilibrer tous les réactifs à température ambiante pendant 15 minutes avant utilisation.
2. Le tampon de lavage doit être dilué à 1:40 avec de l'eau distillée avant utilisation.
3. Ajouter 100 μl de diluant d'échantillon dans le puits correspondant (Ne pas ajouter dans le puits vide, négatif
L'échantillon doit correspondre au nombre de micro-
plaque, chaque plaque doit être équipée d'un contrôle négatif 2 puits, un contrôle positif 1 puits et un vide
le puits de contrôle 1. ajouter un échantillon de 5 μL dans le puits correspondant, mélanger soigneusement à l'aide de la pipette, ajouter
50 μL de contrôle négatif et de contrôle positif vers des puits de contrôle négatif et des puits de contrôle positif (Ne pas
ajouter dans le puits vide).
Remarque: utiliser une pointe de pipette séparée pour chaque échantillon, contrôle négatif et contrôle positif pour
éviter la contamination croisée.
4Agiter doucement pour mélanger pendant 30 secondes. Incuber à 37°C pendant 20 minutes avec la membrane de la plaque de scellement.
Pour sceller la plaque.
5À la fin de l' incubation, retirer et jeter le couvercle de la plaque.
Après le dernier cycle de lavage, tourner la plaque sur le
du papier de séparation ou d'une serviette propre, et appuyez dessus pour enlever les résidus.
6. ajoutant respectivement l'enzyme conjuguée 50μL (ne pas ajouter dans le puits vide)
7Incuber à 37°C pendant 20 minutes avec la membrane de la plaque d'étanchéité.
étape de lavage pendant 5 fois comme à l'étape 5.
8. Ajouter le substrat A 50μL et le substrat B 50μL (ne pas ajouter dans le puits vierge).
10 minutes avec la membrane de la plaque d'étanchéité.
9Ajoutez 50μL de solution de rupture à chaque puits (ne pas ajouter dans le puits vide).
Calibrez le lecteur de plaque avec le dispositif de mesure de la résistance à l' absorption.
Si un instrument à double filtre est utilisé, régler le
La longueur d'onde est de 630 nm.
Valeur limite et évaluer les résultats.
Interprétation des résultats
Chronométrie: Lire la densité optique (DO) de l'échantillon à 450 nm avec un lecteur de micro-plaque.
La valeur moyenne de l'OD du contrôle négatif ≤ 0,1 et la valeur moyenne de l'OD du contrôle positif ≥ 0.8, l'essai est valide,
sinon le test est invalide.
Valeur de coupure (CO) = Valeur moyenne OD du contrôle négatif x 3 (calculée par 0,10 lorsque la moyenne
la valeur OD du contrôle négatif est < 0.10, calculée à partir de la valeur réelle lorsque la moyenne du contrôle négatif OD
valeur est > 0,10)
Résultats positifs: valeur OD de l'échantillon ≥ CO