KIT DE TEST ELISA TB-IGRA

1. Principe

Le test TB-IGRA est un in vitro test diagnostique qui détecte les réponses immunitaires à médiation cellulaire à l'infection par Mycobacterium tuberculosis(MTB) en mesurant l'interféron-gamma (IFN-γ) libéré par les lymphocytes T sensibilisés lors de la stimulation avec des antigènes spécifiques de MTB (par exemple, ESAT-6, CFP-10 et TB7.7).

2. Caractéristiques principales

• Haute spécificité:

  • Utilise des antigènes spécifiques de MTB (absents dans le BCG et la plupart des mycobactéries non tuberculeuses), minimisant les faux positifs.

• Haute sensibilité:

  • Détecte à la fois la tuberculose active et l'infection tuberculeuse latente (ITBL) avec une précision supérieure à celle du test cutané à la tuberculine (TCT).

• Résultats quantitatifs/qualitatifs:

  • La sortie varie selon la plateforme (par exemple, le nombre de points dans les tests ELISPOT ou la concentration d'IFN-γ dans les ELISA).

• Délai d'exécution rapide: Les résultats sont généralement disponibles dans les 24–48 heures.

3. Exigences relatives aux échantillons

• Type d'échantillon: Sang total périphérique frais (hépariné).

• Volume: Habituellement 1–3 mL par test (varie selon le fabricant du kit).

• Stockage: Traiter dans les 8–32 heures (selon les spécifications du kit).

4. Procédure du test

1. Stimulation: Incuber le sang avec des antigènes MTB et des contrôles (contrôle négatif/mitogène).

2. Détection de l'IFN-γ:

   • Basé sur ELISPOT (par exemple, T-SPOT.TB): Compter les lymphocytes T sécréteurs d'IFN-γ sous forme de points.

   • Basé sur ELISA (par exemple, QuantiFERON-TB Gold): Mesurer la concentration d'IFN-γ via un test immunologique.

3. Interprétation:

   • Résultats comparés aux valeurs seuils (varie selon le test).

   • Les résultats indéterminés peuvent nécessiter un nouveau test.

5. Paramètres de performance

• Sensibilité: >90 % pour la tuberculose active, ~80 % pour l'ITBL.

• Spécificité: >95 % (non affectée par la vaccination BCG).

• Réactivité croisée: Minimale avec les mycobactéries non tuberculeuses (MNT).

6. Indications

• Dépistage de l'ITBL dans les groupes à haut risque (par exemple, patients VIH+, immunodéprimés, contacts proches).

• Test supplémentaire pour le diagnostic de la tuberculose active (doit être corrélé aux symptômes cliniques et aux autres tests).

7. Avantages par rapport au TCT

• Pas de réactivité croisée avec le BCG.

• Test en une seule visite (pas de retour pour la lecture).

• Résultats objectifs, en laboratoire.

8. Limites

• Ne peut pas distinguer la tuberculose active de l'ITBL.

• Nécessite un équipement de laboratoire spécialisé.

• Coût plus élevé que le TCT.

• Potentiels faux négatifs chez les patients immunodéprimés.

9. Kits compatibles (exemples)

• T-SPOT.TB (Oxford Immunotec) : basé sur ELISPOT.

• QuantiFERON-TB Gold Plus (Qiagen) : basé sur ELISA.

10. Statut réglementaire

• Approuvé par la FDA/CE/OMS pour le dépistage de l'infection tuberculeuse.

Diagnostic In Vitro

Usage unique

Ce kit contient des réactifs suffisants pour tester un maximum de 28 échantillons par série de tests. Composants de stimulation :

1. Contrôle négatif (couvercle gris)

2. Antigène TB, lyophilisé (couvercle violet)

3. Diluant pour antigène TB (couvercle violet)

4. Contrôle positif (couvercle rouge) 28 tests 28 tests 0,9 mL 28 tests

Composants ELISA

1. Barrette de microplaque

2. Étalon d'IFN-γ humain, lyophilisé (couvercle bleu)

3. Diluant

4. Anticorps marqué à la biotine (bouchon jaune) 12 x 8 puits 2 x flacon 1 x 40 mL 1 x 6 mL

5. Conjugé enzymatique concentré 100X (flacon brun) 1 x 130 µL

6. Tampon de lavage concentré 10X 1 x 40 mL

7. Solution chromogène A

8. Solution chromogène B

9. Solution d'arrêt 1 x 6 mL 1 x 6 mL 1 x 6 mL

PRINCIPE DU TEST