Le virus de la dengue est un flavivirus présent principalement dans les régions tropicales et subtropicales.

Les virus de la dengue sont des sérotypes apparentés, et la transmission est par moustique, principalement Aedes aegypti et Aedes albopictus.

Les virus de la dengue transmis par les moustiques (sérotype 1-4) provoquent la fièvre de la dengue, une maladie grave ressemblant à la grippe.

Les États-Unis, en revanche, sont les premiers pays à connaître une augmentation de l'épidémie dans les régions tropicales du tiers monde et à se propager aux pays développés subtropicaux, y compris aux États-Unis.

Il y a entre 50 et 80 millions de cas de dengue dans le monde chaque année, y compris une forme potentiellement mortelle de la maladie appelée

La première infection par le virus de la dengue entraîne une auto-infection.

maladie limitante caractérisée par une fièvre légère à élevée d' une durée de 3 à 7 jours, des maux de tête sévères avec douleur derrière les yeux,

L'infection secondaire est la forme la plus fréquente de la maladie dans de nombreuses régions du Sud-Est.

Cette forme de la maladie est plus grave et peut entraîner la DHF et le DSS.Les principaux symptômes cliniques

Le taux de mortalité peut atteindre 40%.

Le diagnostic du SDS est particulièrement important, car les patients peuvent mourir dans les 12 à 24 heures si un traitement approprié n' est pas administré.

L'administration de

L'infection primaire par le virus de la dengue est caractérisée par une élévation des taux d'antigène NS1 spécifique de 0 à 9 jours après le début de la maladie.

Un diagnostic précoce de la dengue réduit le risque de complications telles que DHF ou DSS,

particulièrement dans les pays où la dengue est endémique.

Procédure d'essai

1Tous les réactifs doivent être laissés à température ambiante pendant 15 minutes avant utilisation.

2. Le tampon de lavage doit être dilué à 1:40 avec de l'eau distillée avant utilisation.

3. Ajouter 100 μl de diluant d'échantillon dans le puits correspondant, ajouter 10 μl d'échantillon dans le puits correspondant (ne pas ajouter dans le puits vierge).Ajouter 100 μl de contrôle positif et de contrôle négatif au puits de contrôle positif et au puits de contrôle négatifL'échantillon doit correspondre au nombre de micro-plaques, chaque plaque doit être dotée de 2 puits de contrôle négatif, de 1 puits de contrôle positif et d'un puits de contrôle blanc.

Remarque: utiliser une pointe de pipette séparée pour chaque échantillon, contrôle négatif et contrôle positif afin d'éviter la contamination croisée.

4Agiter doucement pour mélanger pendant 30 secondes, incuber à 37°C pendant 30 minutes avec la membrane de la plaque d'étanchéité.

5. À la fin de l'incubation, retirer et jeter le couvercle de la plaque. Retirer, ajouter le tampon de lavage à chaque puits pendant 20 secondes. Répétez 5 fois. Après le cycle de lavage final, lavez la plaque de lavage.tourner la plaque sur du papier à enduire ou une serviette propre, et appuyez dessus pour enlever les résidus.

6. ajoutant respectivement le conjugué 50 μL (ne pas ajouter dans le puits vide).

7Incuber à 37°C pendant 30 minutes avec la membrane de la plaque d'étanchéité qui scelle la plaque. Répétez l'étape de lavage 5 fois comme à l'étape 5.

8. Ajouter le substrat A (50μL) et le substrat B (50μL) (ne pas ajouter dans le puits vierge).

9. Ajouter 50 μL de solution d'arrêt à chaque puits (ne pas ajouter dans le puits vierge). mélanger doucement en agitant, lire l'absorbance dans les 10 minutes suivant l'arrêt de la réaction.Calibrer le lecteur de plaque avec le puits en blanc et lire l'absorbance à 450nm. Si un instrument à double filtre est utilisé, régler la longueur d'onde de référence à 630 nm. Ne pas régler les puits vides est autorisé si vous utilisez une double longueur d'onde pour détecter. Calculer la valeur de coupe et évaluer les résultats.

• Conserver à une température de 2 à 8°C.

• Placez les puits non utilisés dans le sac en aluminium en feuille de papier à fermeture à glissière et remettez-les à 2-8 °C, dans ces conditions, les puits resteront stables pendant 2 mois,ou jusqu' à la date de péremption indiquée sur l' étiquette, selon la première date..

• Fermer et remettre les calibrateurs non utilisés à 2-8 °C, dans ces conditions la stabilité sera conservée pendant 1 mois, pour une utilisation plus longue, conserver les calibrateurs ouverts en aliquotes et les congeler à 20 °C.Évitez les cycles de congélation et de décongélation.

• Fermer et remettre tous les autres réactifs non utilisés à 2-8 °C, dans ces conditions la stabilité sera conservée pendant 2 mois, ou jusqu'à la date de péremption indiquée sur l'étiquette, selon la première.