Kit de test ELISA pour la vitamine D 25-OH

Utilisation prévue

Kit de détection de la vitamine D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA). Il est utilisé dans les tests quantitatifs de la vitamine D dans le sérum humain.

Résumé et signification clinique

 La vitamine D est un précurseur de l'hormone liposoluble qui est produite principalement par l'exposition de la peau à la lumière du soleil.Notre corps ne peut synthétiser que la vitamine D3La vitamine D2 peut être prise par des aliments enrichis ou par des suppléments.les vitamines D3 et D2 se lient à la protéine de liaison de la vitamine D (VDBP) dans le plasma et sont transportées au foie pour devenir 25-hydroxyvitamine D (25-OH vitamine D)Comme la vitamine D 25-OH est la principale forme de stockage, sa concentration sanguine peut être utilisée pour évaluer l'état général de la vitamine D. Plus de 95% de la vitamine D 25-OH mesurable dans le sérum est de la vitamine D 25-OH3.,La vitamine D2 est essentielle pour la santé des os, et chez les enfants, une carence sévère peut entraîner le rachitisme.Chez les personnes âgéesEn outre, les faibles concentrations de vitamine D 25-OH sont associées à une faible densité osseuse.L'insuffisance de vitamine D a également été associée au diabète.Les deux suppléments alimentaires de vitamine D actuellement sur le marché (vitamine D2 et vitamine D3) sont convertis en vitamine D à 25-OH dans le foie.La somme des concentrations de vitamine D2 à 25-OH et de vitamine D3 à 25-OH dans le sérum ou le plasma est appelée "vitamine D à 25-OH totale".." Dans les milieux cliniques, une surveillance précise des taux totaux de vitamine D 25-OH est essentielle. Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicL'analyse totale de la vitamine D utilise des anticorps spécifiques pour capturer les 25-hydroxyvitamines D3 et D2.L'essai est conçu pour mesurer quantitativement la vitamine D 25-OH totale dans le sérum et le plasma humain afin d'aider à l'évaluation de la vitamineD suffisance.

Principe

Le kit de test quantitatif de la vitamine D 25-OH est basé sur un test immunosorbant en phase solide lié à une enzyme.Le système d'analyse utilise un anticorps pour l'immobilisation en phase solide (microtiter wells) et un autre anticorps monoclonal dans les solutions.Le troisième anticorps qui reconnaît le deuxième anticorps conjugué à une enzyme (peroxydase du raifort).les normes et l'échantillon d'essai (sérum) sont ajoutés aux microtiteurs recouverts d'anticorps de vitamine D à 25-OH, incubation 30 minutes avec le deuxième anticorps. Après le lavage, le troisième anticorps étiqueté avec la peroxydase du raifort (conjugué) est ajouté. Si la vitamine D 25-OH humaine est présente dans l'échantillon,il se combinera avec l'anticorps sur le puits et le conjugué enzymatique, formant des sandwichs entre la phase solide et les anticorps liés à l'enzyme.les puits sont lavés avec de l'eau pour éliminer les anticorps non liés. Une solution de TMB est ajoutée et incubée pendant 20 minutes, ce qui donne le développement d'une couleur bleue.La couleur est changée en jaune et mesurée spectrophotométriquement à 450 nmLes concentrations de vitamine D sont directement proportionnelles à l'intensité de couleur de l'échantillon.

Préparations

1Laisser tous les échantillons et réactifs atteindre la température ambiante (~ 25°C) et mélanger soigneusement par inversion douce avant utilisation.

2.Préparez le tampon de lavage en diluant le concentré de lavage 20 fois avec de l'eau désionisée. La solution de lavage diluée est stable à température ambiante pendant au moins une semaine.

Précautions pour les utilisateurs

1. La manipulation doit exclure toute pipette par voie orale. Utilisez uniquement des pipettes à bout jetable pour chaque spécimen.

2Ne mélangez pas les matières de différents lots maîtres. N'utilisez pas les composants du kit après la date de péremption.

3Tous les matériaux doivent être mis à température ambiante avant utilisation.