Objectifs:
Ce kit permet de déterminer les concentrations d'hème libre dans le sang entier.
Principe de l'analyse
Le kit analyse le taux d'hème libre humain dans l'échantillon, utilise l'anticorps hème libre humain purifié pour recouvrir les puits de plaque de microtiter, faire des anticorps en phase solide, puis ajouter de l'hème libre aux puits,Anticorps hème libres combinés qui sont marqués HRP, devient complexe anticorps-antigène-enzyme-anticorps, après lavage complètement, ajouter TMB solution de substrat, TMB substrat devient de couleur bleue à HRP enzyme-catalysé,La réaction est terminée par l'ajout d'une solution d'acide sulfurique et le changement de couleur est mesuré spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nmLa concentration d'hème libre humain dans les échantillons est ensuite déterminée en comparant la surdose des échantillons à la courbe standard.
Paramètres techniques:
| Nom du produit: |
Kit de test ELISA RUO pour l'hème libre chez l'homme |
| Pays d'origine: |
Chine |
| Type de l'échantillon: |
Serum et plasma |
| Exemplaire: |
Serum 50 μl |
| Température de stockage: |
2 à 8°C |
| Durée de conservation: |
6 mois |
| Sensitivité: |
Très haut |
| Temps d' évaluation: |
1 heure |
| Taille du kit: |
96 essais |
| Applications: |
Diagnostic médical |
Matériaux fournis avec le kit:
| 1 |
solution de lavage |
20 ml × 1 bouteille |
7 |
Arrêtez la solution |
Bouteille de 6 ml × 1 |
| 2 |
Réactif HRP-conjugué |
Bouteille de 6 ml × 1 |
8 |
Standard ((4 μg/ml) |
0.5 ml × 1 flacon |
| 3 |
Microelisa strip-plate |
12 bien × 8 bandes |
9 |
Diluant standard |
1.5 ml × 1 bouteille |
| 4 |
Diluant d'échantillon |
Bouteille de 6 ml × 1 |
10 |
Instruction |
1 |
| 5 |
Solution de chromogène A |
Bouteille de 6 ml × 1 |
11 |
Membrane de plaque de fermeture |
2 |
| 6 |
Solution de chromogène B |
Bouteille de 6 ml × 1 |
12 |
Sacs scellés |
1 |
Exigences relatives aux échantillons
- L'extraction doit être effectuée le plus rapidement possible après la collecte des spécimens, et conformément à la littérature pertinente, et l'expérience doit être réalisée le plus rapidement possible après l'extraction.l'échantillon peut être conservé à -20 °C pour préserverÉvitez les cycles de congélation et de décongélation répétés.
- Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe le HRP actif.
Procédure d'évaluation
- Diluer et ajouter l'échantillon:Diluer Densité initiale Norme comme indiqué dans le tableau suivant:
| 2 μg/ml |
5 Norme |
150 μl Densité initiale Standard + 150 μl diluant standard |
| 1 μg/ml |
4 Norme |
150 μl 5 standard + 150 μl diluant standard |
| 0.5 μg/ml |
3 Norme |
150 μl 4 standard + 150 μl diluant standard |
| 00,25 μg/ml |
2 Norme |
150 μl 3 Standard + 150 μl diluant standard |
| 0.125 μg/ml |
1 Norme |
150 μl 2 Standard + 150 μl diluant standard |
2.ajouter l'échantillon:Mettre les puits vides séparément (les puits de comparaison vides n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif HRP-Conjugate, autrement chaque étape de l'opération est la même).Ajouter 50 μl de norme à la stripplate de Microelisa, ajouter 40 μl de dilution de l'échantillon au puits de l'échantillon d'essai, puis ajouter l'échantillon d'essai de 10 μl (la dilution finale de l'échantillon est de 5 fois), ajouter l'échantillon aux puits, ne pas toucher la paroi du puits autant que possible, et mélanger doucement.
3.Incubation: après fermeture de la plaque avec une membrane de la plaque de fermeture, incubation pendant 30 min à 37°C.
4.Configurer le liquide: solution de lavage 30 fois (ou 20 fois) diluée 30 fois (ou 20 fois) avec de l'eau distillée et de la réserve.
5.lavage: Découvrir la membrane de la plaque de fermeture, jeter le liquide, sécher par balancement, ajouter du tampon de lavage à chaque puits, rester immobile pendant 30 secondes puis vider, répéter 5 fois, sécher par tapotement.
6.ajouter une enzyme:ajouter 50 μl de réactif HRP-conjugué à chaque puits, sauf puits vierge.
7.incubation: Opération avec 3.
8.lavage: Opération avec 5.
9.couleur: Ajouter à chaque puits la solution de chromogène A 50ul et la solution de chromogène B 50ul, éviter la conservation de la lumière pendant 10 min à 37°C
10Arrêtez la réaction: Ajoutez 50 μl de solution d'arrêt à chaque puits, arrêtez la réaction ((la couleur bleue change de couleur jaune).
11.essai:prendre le puits vide à zéro, lire l'absorbance à 450 nm après ajout de la solution stop et dans les 15 min.
Calculer
Prenez la densité standard comme horizontale, la valeur OD pour la verticale, dessinez la courbe standard sur du papier graphique,Trouver la densité correspondante selon la valeur de l'échantillon OD par la courbe de l'échantillon, multiplié par le multiple de dilution, ou calculer l'équation de régression linéaire de la courbe standard avec la densité standard et la valeur OD,avec la valeur OD de l'échantillon dans l'équation,calculer la densité de l'échantillon, multiplié par le facteur de dilution, on obtient la densité réelle de l'échantillon.
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