Essai Kit Vitamin D3 Elisa Kit For Research Use d'Elisa VD3 RUO de sandwich

Vitamine humaine D3 ; VD3 ELISA Kit

• Date d'échéance : six mois.
• Stockage : 2-8℃.
• Notre kit humain de la vitamine D3 (VD3) ELISA est d'analyser des niveaux de la vitamine D3 (VD3) en sérum humain, plasma, milieux de culture ou n'importe quel fluide biologique.

Principe

Ce kit d'ELISA emploie le sandwich-ELISA comme méthode. Le stripplate de Microelisa fourni dans ce kit a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps spécifique à la vitamine D3 (VD3). Des normes ou les échantillons sont ajoutés aux puits appropriés de stripplate de Microelisa et ont combiné à l'anticorps spécifique. Puis une peroxydase de raifort (HRP) - anticorps conjugué spécifique pour la vitamine D3 (VD3) est ajoutée à chaque stripplate de Microelisa bien et incubée. Des composants libres sont enlevés. La solution de substrat de TMB est ajoutée à chaque puits. Seulement ces puits qui contiennent la vitamine D3 (VD3) et HRP ont conjugué l'anticorps de la vitamine D3 (VD3) sembleront bleus en couleurs et puis tourneront jaune après l'addition de la solution d'arrêt. La densité optique (OD) est mesurée spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nanomètre. La valeur d'OD est proportionnelle à la concentration de la vitamine D3 (VD3). Vous pouvez calculer la concentration de la vitamine D3 (VD3) dans les échantillons en comparant l'OD des échantillons à la courbe standard.

Matériaux équipés de kit

• Dilution des normes

Dix puits sont placés pour des normes dans un stripplate de Microelisa. Dans bien 1 et bien 2, la solution étalon 100μl et le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et mélangés bien. Dans bien 3 et bien 4, la solution 100μl bien de 1 et bien 2 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. la solution 50μl est jetée du puits 3 et bien 4. Dans bien 5 et bien 6, la solution 50μl bien de 3 et bien 4 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. Dans bien 7 et bien 8, la solution 50μl bien de 5 et bien 6 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. Dans bien 9 et bien 10, la solution 50μl bien de 7 et bien 8 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. la solution 50μl est jetée du puits 9 et bien 10. Après dilution, tout le volume dans tous les puits sont 50μl et les concentrations sont 30 ng/ml, 20 ng/ml, 10 ng/ml, 5 ng/ml et 2,5 ng/ml, respectivement.

Calcul des résultats

  Des concentrations connues de la norme humaine et de sa lecture correspondante OD de la vitamine D3 (VD3) est tracées sur l'échelle de rondin (axe des abscisses) et l'échelle de rondin (axe des y) respectivement. La concentration de la vitamine humaine D3 (VD3) dans l'échantillon est déterminée par la traçage l'O.D. de l'échantillon sur l'axe des y. La concentration originale est calculée en multipliant le facteur de dilution.

Précision

précision d'Intra-analyse (précision dans une analyse) : 3 échantillons avec la basse, moyenne et de haut niveau vitamine humaine D3 (VD3) ont été examinés 20 fois d'un plat, respectivement.

précision d'Inter-analyse (précision entre les analyses) : 3 échantillons avec la basse, moyenne et de haut niveau vitamine humaine D3 (VD3) ont été examinés de 3 plats différents, 8 répliques dans chaque plat.

Cv (%) = SD/meanX100

Intra-analyse : Cv<10>

Inter-analyse : Cv<12>

Chaîne d'analyse

0,8 ng/ml -36 ng/ml

Sensibilité :

0,3 ng/ml

• Stockez le kit à 4°C sur le reçu. Le kit devrait être équilibré à la température ambiante avant l'analyse. Enlevez toutes les bandes inutiles du plat Anticorps-enduit humain de la vitamine D3 (VD3), rescellez-les dans l'aluminium zip-lock et gardez à 4°C.
• La courbe standard devrait être incluse dans chaque analyse. Des puits repliés sont recommandés. Si la valeur d'OD de l'échantillon est plus grande que le premier puits des normes, diluez svp l'échantillon (temps de n) avant essai. En calculant la concentration originale en vitamine D3 (VD3), multipliez svp tout le facteur de dilution (XnX5).