Sous-unité Alpha Mouse IL2R CD25 IL2-RA ELISA Kit du récepteur Interleukin-2

Alpha de sous-unité de récepteur de la souris Interleukin-2 ; IL2R ; CD25 ; Kit d'IL2-RA ELISA

Matériaux équipés de kit

Conditions de spécimen

• la coagulation de sérum à la température ambiante 10-20 minutes, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore.
• l'EDTA adapté parutilisation ou citrater le plasma comme anticoagulant, mélange 10-20 minutes, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore.
• Urine-rassemblez pour poursuivre un conteneur stérile, la centrifugation 20 que la minute à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore. L'opération de Hydrothorax et référence de fluide céphalo-rachidien à elle.
• la culture cellulaire surnageant-détectent les composants sécréteurs, se rassemblent pour poursuivre un conteneur stérile, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 pour enlever le surnageant, détecter la composition des cellules, suspension de cellules de Dilut avec PBS (PH7.2-7.4), concentration en cellules a atteint 1 million/ml, cycles gel-dégel répétés, cellules de dommages et la libération des composants intracellulaires, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant, si la précipitation apparaissait, centrifugeur encore.
• Les échantillons de tissu après coupure des échantillons, vérifient le poids, ajoutent PBS (PH7.2-7.4), rapidement congelé avec de l'azote liquide, maintiennent des échantillons à 2-8℃ après fonte, ajoutent PBS (PH7.4), homogénéisé à la main ou les broyeurs, minute de la centrifugation 20 à la vitesse de t/mn 2000-3000 enlèvent le surnageant.
• extrayez dès que possible après collection de spécimen, et selon la littérature appropriée, et devriez être expérience dès que possible après l'extraction. Si elle ne peut pas, le spécimen peut être maintenu dans le ℃ -20 pour préserver, Avoid a répété les cycles gel-dégel.
• Ne peut pas détecter l'échantillon qui contiennent NaN3, parce que NaN3 empêche HRP actif.

Principe

Ce kit d'ELISA emploie le sandwich-ELISA comme méthode. Le stripplate de Microelisa fourni dans ce kit a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps spécifique à IL2R. Des normes ou les échantillons sont ajoutés aux puits appropriés de stripplate de Microelisa et ont combiné à l'anticorps spécifique. Puis une peroxydase de raifort (HRP) - anticorps conjugué spécifique pour IL2R est ajoutée à chaque stripplate de Microelisa bien et incubée. Des composants libres sont enlevés. La solution de substrat de TMB est ajoutée à chaque puits. Seulement ces puits qui contiennent IL2R et HRP ont conjugué l'anticorps de thrombomodulin sembleront bleus en couleurs et puis tourneront jaune après l'addition de la solution d'arrêt. La densité optique (OD) est mesurée spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nanomètre. La valeur d'OD est proportionnelle à la concentration d'IL2R. Vous pouvez calculer la concentration d'IL2R dans les échantillons en comparant l'OD des échantillons à la courbe standard.

Notes :

• Stockez le kit à 4°C sur le reçu. Le kit devrait être équilibré à la température ambiante avant l'analyse. Enlevez toutes les bandes inutiles du plat Anticorps-enduit d'IL2R, rescellez-les dans l'aluminium zip-lock et gardez à 4°C.
• Les précipités peuvent apparaître dans le tampon de lavage concentré. Veuillez chauffer le tampon pour dissoudre tous les précipités, qui n'affecteront pas les résultats.
• La pipette précise devrait être utilisée pour éviter l'erreur expérimentale. Des échantillons devraient être ajoutés au Microplate en moins de 5 minutes. Si un grand nombre d'échantillons sont inclus, la pipette de canal multiple est recommandée.
• La courbe standard devrait être incluse dans chaque analyse. Des puits repliés sont recommandés. Si la valeur d'OD de l'échantillon est plus grande que le premier puits des normes, diluez svp l'échantillon (temps de n) avant essai. En calculant la concentration originale de thrombomodulin, multipliez svp tout le facteur de dilution (XnX5).
• Afin d'éviter la contamination transversale, les scelleurs de Microplate sont pour l'usage ancien seulement.
• Veuillez garder le substrat à partir de la lumière.
• Toute l'opération devrait être accord avec les instructions du fabricant strictement. Les résultats déterminés par le lecteur de plat de microtitre.
• Tous les échantillons, tampon de lavage et déchets devraient être traités comme agents infectieux.
• Des réactifs de différents sorts ne devraient pas être mélangés.