Principe de l'analyse
Ce kit permet de déterminer les concentrations de P53 dans le sérum du rat, les supernats de culture cellulaire et autres fluides biologiques.
Le kit analyse le niveau de CD16 humain dans l'échantillon, utilise l'anticorps purifié humain CD16 pour recouvrir les puits de la plaque de microtiter, faire des anticorps en phase solide, puis ajouter CD16 aux puits,Anticorps CD16 combinés avec HRP,devenir un complexe anticorps-antigène-enzyme-anticorps, après le lavage complètement, ajouter une solution de substrat TMB, le substrat TMB devient bleu à HRP catalysé par l'enzyme,La réaction est terminée par l'ajout d'une solution d'acide sulfurique et le changement de couleur est mesuré spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nmLa concentration de CD16 humain dans les échantillons est ensuite déterminée en comparant l'O.D. des échantillons à la courbe standard.
Matériaux fournis avec le kil est
| 1 |
solution de lavage |
20 ml × 1 bouteille |
7 |
Arrêtez la solution |
Bouteille de 6 ml × 1 |
| 2 |
Réactif HRP-conjugué |
Bouteille de 6 ml × 1 |
8 |
Norme ((20 μg/l) |
0.5 ml × 1 flacon |
| 3 |
Microelisa strip-plate |
12 bien × 8 bandes |
9 |
Diluant standard |
1.5 ml × 1 bouteille |
| 4 |
Diluant d'échantillon |
Bouteille de 6 ml × 1 |
10 |
Instruction |
1 |
| 5 |
Solution de chromogène A |
Bouteille de 6 ml × 1 |
11 |
Membrane de plaque de fermeture |
2 |
| 6 |
Solution de chromogène B |
Bouteille de 6 ml × 1 |
12 |
Sacs scellés |
1 |
Exigences relatives aux échantillons
- L'extraction doit être effectuée le plus rapidement possible après la collecte des spécimens, et conformément à la littérature pertinente, et l'expérience doit être réalisée le plus rapidement possible après l'extraction.l'échantillon peut être conservé à -20 °C pour préserverÉvitez les cycles de congélation et de décongélation répétés.
- Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe le HRP actif.
Procédure d'évaluation
- Diluer et ajouter l'échantillon:Diluer Densité initiale Norme comme indiqué dans le tableau suivant:
| 10 μg/l |
5 Norme |
150 μl Densité initiale Standard + 150 μl diluant standard |
| 5 μg/l |
4 Norme |
150 μl 5 standard + 150 μl diluant standard |
| 2.5 μg/l |
3 Norme |
150 μl 4 standard + 150 μl diluant standard |
| 10,25 μg/l |
2 Norme |
150 μl 3 Standard + 150 μl diluant standard |
| 00,625 μg/l |
1 Norme |
150 μl 2 Standard + 150 μl diluant standard |
2.ajouter l'échantillon:Mettre les puits vides séparément (les puits de comparaison vides n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif HRP-Conjugate, autrement chaque étape de l'opération est la même).Ajouter 50 μl de norme à la stripplate de Microelisa, ajouter de la dilution d'échantillon de 40 μl au puits d'échantillon d'essai, puis ajouter l'échantillon d'essai de 10 μl (la dilution finale de l'échantillon est de 5 fois), ajouter l'échantillon aux puits, ne pas toucher la paroi du puits autant que possible, et mélanger doucement.
3.Incubation: après fermeture de la plaque avec une membrane de la plaque de fermeture, incubation pendant 30 min à 37°C.
4.Configurer le liquide: solution de lavage 30 fois (ou 20 fois) diluée 30 fois (ou 20 fois) avec de l'eau distillée et de la réserve.
5.lavage: Découvrir la membrane de la plaque de fermeture, jeter le liquide, sécher par balancement, ajouter du tampon de lavage à chaque puits, rester immobile pendant 30 secondes puis vider, répéter 5 fois, sécher par tapotement.
6.ajouter une enzyme:ajouter 50 μl de réactif HRP-conjugué à chaque puits, sauf puits vierge.
7.incubation: Opération avec 3.
8.lavage: Opération avec 5.
9.color: Ajouter à chaque puits la solution de chromogène A 50ul et la solution de chromogène B 50ul, éviter la conservation de la lumière pendant 15 min à 37°C
10Arrêtez la réaction: Ajoutez 50 μl de solution d'arrêt à chaque puits, arrêtez la réaction ((la couleur bleue change en jaune).
11.essai:prenez le puits vide à zéro, lisez l'absorbance à 450 nm après ajout de la solution d'arrêt et dans les 15 min.
Votre message doit contenir entre 20 et 3 000 caractères!
