Kit de test ELISA pour la vitamine D 25-OH

Utilisation prévue

Kit de détection de la vitamine D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA). Il est utilisé dans les tests quantitatifs de la vitamine D dans le sérum humain.

Résumé et signification clinique

La vitamine D est un précurseur d'hormone liposoluble qui est principalement produite dans la peau par exposition à la lumière du soleil.Notre corps ne peut synthétiser que la vitamine D3La vitamine D2 est absorbée par les aliments enrichis ou par des suppléments.la vitamine D3 et la vitamine D2 sont liées à la protéine de liaison à la vitamine D (VDBP) dans le plasma et transportées au foie pour devenir de la vitamine D 25-hydroxy (25-OH vitamine D)Comme la vitamine D à 25-OH est la forme de stockage principale, sa concentration sanguine est utilisée pour évaluer l'état général de la vitamine D. Plus de 95% de la vitamine D à 25-OH, mesurable dans le sérum, est contenue dans le sang.est de la vitamine D3 alors que la vitamine D2 atteint des niveaux mesurables uniquement chez les patients prenant des suppléments de vitamine D2La vitamine D est essentielle pour la santé des os. Chez les enfants, une carence grave entraîne le rachitisme. Chez les personnes âgées, le risque de chute est attribué à une carence en vitamine D due à une faiblesse musculaire.,Des concentrations faibles de vitamine D 25-OH sont associées à une densité minérale osseuse plus faible.Les deux suppléments alimentaires de vitamine D actuellement disponibles sur le marché (vitamine D2 et vitamine D3) sont convertis en vitamine D 25-OH dans le foie.La somme des concentrations de vitamine D2 à 25-OH et de vitamine D3 à 25-OH dans le sérum ou dans le plasma est appelée vitamine D à 25-OH totale.Une surveillance précise du taux total de vitamine D 25-OH est essentielle en milieu clinique.. Vitamin D deficient patients who are prescribed a daily Vitamin D supplement should regularly monitor their serum or plasma Vitamin D levels in order to reach an optimal level and prevent their 25-OH Vitamin D concentrations from reaching excessive levels that are considered toxicL'analyse totale de la vitamine D utilise des anticorps spéciaux pour capturer à la fois la 25-hydroxyvitamine D3 et D2.Ce test est destiné à la détermination quantitative de la vitamine D 25-OH totale dans le sérum humain et le plasma., comme aide à l'évaluation de la suffisance en vitamine D.

Principe

Le kit de test quantitatif de la vitamine D 25-OH est basé sur un test immunosorbant en phase solide lié à une enzyme.Le système d'analyse utilise un anticorps pour l'immobilisation en phase solide (microtiter wells) et un autre anticorps monoclonal dans les solutions.Le troisième anticorps qui reconnaît le deuxième anticorps conjugué à une enzyme (peroxydase du raifort).les normes et l'échantillon d'essai (sérum) sont ajoutés aux microtiteurs recouverts d'anticorps de vitamine D à 25-OH, incubation 30 minutes avec le deuxième anticorps. Après le lavage, le troisième anticorps étiqueté avec la peroxidase de raifort (conjugué) est ajouté. Si la vitamine D 25-OH humaine est présente dans l'échantillon,il se combinera avec l'anticorps sur le puits et le conjugué enzymatique, formant des sandwichs entre la phase solide et les anticorps liés à l'enzyme.les puits sont lavés avec de l'eau pour éliminer les anticorps non liés. Une solution de TMB est ajoutée et incubée pendant 20 minutes, ce qui donne le développement d'une couleur bleue.La couleur est changée en jaune et mesurée spectrophotométriquement à 450 nmLes concentrations de vitamine D sont directement proportionnelles à l'intensité de couleur de l'échantillon.

Réactifs fournis

Microplate revêtue: 1 plaque (8×12 puits), prête à l'emploi. Plaque monoclonale anti- 25-OH anti-vitamine D recouverte de microtiter et scellée dans un sac en aluminium.Retirez les bandes dans le sac ré-fermé avec un sécheur pour les protéger de l'humidité après ouvertureConserver à 2 à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Conjugé HRP:Conserver à 2 à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Le calibreur:6 flacons de 0,2 ml, étiquetés de S0 à S5 et la concentration de PRL est de 0, 10, 20, 50,100Conserver à 2 à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Le contrôle:2 flacons de 0, 2 ml.

Diluant pour échantillon de vitamine D:Conserver à 2°C à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Substrate TMB:1 flacon de 12 ml, prêt à l' utilisation, conservé à 2 à 8°C jusqu' à la date de péremption.

Arrêtez la Solution:1 flacon de 12 ml, prêt à l' utilisation, conservé à 2 à 8°C jusqu' à la date de péremption.

Puffer de lavage:1 flacon de 15 ml, concentré 50 fois, dilué avec de l'eau désionisée avant l'essai, conservé à 2 à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Le scellant de plaque:Deux pièces.

Sacs en plastique recouvertables:Un jeu.

Le manuel d'utilisation:Une copie.

Préparations

1Laisser tous les échantillons et réactifs atteindre la température ambiante (~ 25°C) et bien mélanger par inversion douce avant utilisation.

2.Préparez le tampon de lavage en diluant le concentré de lavage 20 fois avec de l'eau désionisée. La solution de lavage diluée est stable à température ambiante pendant au moins une semaine.

Précautions pour les utilisateurs

1. La manipulation doit exclure toute pipette par voie orale. Utilisez uniquement des pipettes à bout jetable pour chaque spécimen.

2Ne mélangez pas les matières de différents lots maîtres. N'utilisez pas les composants du kit après la date de péremption.

3Tous les matériaux doivent être mis à température ambiante avant utilisation.