Kit de test ELISA pour les anticorps (IgE)

Utilisation prévue

  Ce kit est une détection quantitative de l'anticorps IgE total (IgE) dans le sérum/plasma humain in vitro.Des tests d' IgE total peuvent également être recommandés pour les patients suspectés d' une maladie parasitaire..

Le principe de l'épreuve

  L'hypersensibilité immédiate (allergies de type I) est médiée par des IgE spécifiques.l' augmentation de l' IgE spécifique chez les patients est accompagnée d' une augmentation du titre total d' IgEEn général, les unités internationales par millilitre (UI/mL) sont définies comme suit: 1 UI/mL équivaut à 2,4 ng IgE.Les taux d' IgE peuvent atteindre 50En outre, les titres d' IgE sont élevés chez les patients atteints de maladies parasitaires.

Le réactif n'est pas recommandé pour l'examen physique des personnes en bonne santé, les résultats des tests positifs ou négatifs ne sont obtenus que pour les résultats positifs ou négatifs des tests d'anticorps IgE correspondants,Corrélation de l'incertitude avec le patient est malade et peut ne pas être l'indice unique d'évaluation des patients, doit être combinée à la présentation clinique du patient et à d' autres tests de laboratoire pour une analyse intégrée de la maladie.

La méthode de détection de cette trousse est l'immunodétection liée à l'enzyme.Les anticorps monoclonaux qui reconnaissent les anti-IgE ont été pré-enduits dans les puits de la microplate, et des échantillons de sérum/plasma humain et un autre anticorps monoclonal marqué par une enzyme ont été ajoutés dans les pores de la plaque.La valeur OD a été lue et son contenu a été calculé par un lecteur de microplate.

Procédure d'essai

1.Tous les réactifs doivent être laissés à température ambiante pendant 15 minutes avant utilisation.

2. Le tampon de lavage doit être dilué à 1:40 avec de l'eau distillée avant utilisation.

3L'échantillon doit correspondre au nombre de micro-plaques, chaque plaque doit être équipée de puits de référence (le nombre de puits est déterminé par la référence et le spécimen à tester).

Remarque: utiliser une pointe de pipette d'élimination séparée pour chaque échantillon, chaque référence afin d'éviter la contamination croisée.

4. Ajouter 100 μl de diluant d'échantillon dans le puits correspondant, ajouter 20 μl de chaque référence S0, S1, S2, S3, S4, S5 et de l'échantillon respectivement au puits correspondant.

5Agiter doucement pour le mélanger. Incuber à 37°C pendant 30 minutes avec la membrane de la plaque d'étanchéité.

6. À la fin de l'incubation, retirer et jeter le couvercle de la plaque. Retirer, ajouter le tampon de lavage à chaque puits pendant 10 secondes. Répétez 5 fois. Après le cycle de lavage final, lavez la plaque de lavage.tourner la plaque sur du papier à enduire ou une serviette propre, et appuyez dessus pour enlever les résidus.

7. Ajouter respectivement 100 μl de conjugué. Incuber à 37°C pendant 30 minutes avec la membrane de la plaque d'étanchéité qui scelle la plaque.

8Lavez l'assiette à l'étape 6.

9. Ajouter le substrat A (50μL) et le substrat B (50μL). Agiter doucement pour le mélanger. Incuber à 37°C pendant 10 minutes avec la membrane de la plaque d'étanchéité scellant la plaque.

10. Ajouter 50 μl de solution d'arrêt à chaque puits. Mélanger doucement en agitant, lire l'absorbance dans les 10 minutes suivant l'arrêt de la réaction.Ensuite, lisez la valeur d'absorbance à 450 nm/ 630 nm avec le lecteur de microplaques.Calculer la concentration et évaluer les résultats.