Kit de test Elisa pour le TNF-α chez l'homme

Utilisation prévue

Ce kit est utilisé pour la détermination des concentrations de TNF-α dans les cultures de cellules humaines.

Procédure d'évaluation

1- diluer et ajouter l'échantillon:diluer densité initiale 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2.ajouter l'échantillon:Mettre les puits vierges séparément (les puits vierges de comparaison n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif HRP-Conjugate, autrement chaque étape de l'opération est la même).Ajouter 50 μl de norme à la stripplate de MicroelisaAjouter 40 μl de dilution de l'échantillon à l'échantillon d'essai, puis ajouter l'échantillon d'essai de 10 μl (la dilution finale de l'échantillon est de 5 fois), ajouter l'échantillon à l'échantillon, ne pas toucher la paroi de l'échantillon autant que possible, et mélanger doucement.

3.Incubation: après fermeture de la plaque avec une membrane de la plaque de fermeture, incubation pendant 30 min à 37°C.

4.Configurer le liquide: solution de lavage 30 fois (ou 20 fois) diluée 30 fois (ou 20 fois) avec de l'eau distillée et de la réserve.

5Laver: Découvrir la membrane de la plaque de fermeture, jeter le liquide, le sécher par balancement, ajouter du tampon de lavage à chaque puits, le maintenir pendant 30 secondes, puis le vidanger, répéter 5 fois, le sécher par tapotement.

6.ajouter une enzyme: ajouter 50 μl de réactif HRP-conjugué à chaque récipient, à l'exception du récipient blanc.

7.incubation: Opération avec 3.

8.lavage: Opération avec 5.

9.color: Ajouter à chaque récipient une solution de chromogène A 50ul et une solution de chromogène B 50ul, éviter la conservation à la lumière pendant 10 min à 37°C

10Arrêtez la réaction: Ajoutez 50 μl de Solution d'arrêt à chaque réaction, Arrêtez la réaction ((la couleur bleue change en jaune).

11.essai: prenez le blanc à zéro, lisez l'absorbance à 450 nm après l'ajout de la solution d'arrêt et dans les 15 min.

Exigences relatives aux échantillons

1. extraire le plus tôt possible après la collecte des spécimens et selon la littérature pertinente, et doit être expérimenté le plus tôt possible après l'extraction.Un spécimen peut être conservé à 20 °C pour préserverÉvitez les cycles de congélation et de décongélation répétés.

2. Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe l'activité du HRP.

Notes importantes

1Le kit doit être retiré du réfrigérateur et maintenu à température ambiante pendant 15 à 30 minutes, les plaques ELISA doivent être recouvertes si elles ne sont pas usées après ouverture.la plaque doit être conservée dans un sac scellé.

2Le lavage n'affecte pas le résultat.

3. ajouter l'échantillon avec un échantillonneur à chaque étape, et de relire sa précision fréquemment, éviter l'erreur expérimentale. ajouter l'échantillon dans les 5 min, si le nombre d'échantillons est beaucoup, recommandons d'utiliser Voley.

4. si la teneur en matière d'essai est excessivement élevée (la DO de l'échantillon est supérieure à la première valeur standard), veuillez diluer l'échantillon (n fois), veuillez diluer et multiplier par le facteur de dilution.(×n×5).

5La membrane de la plaque de fermeture limite uniquement l'utilisation jetable, afin d'éviter la contamination croisée.

6Le substrat évite la conservation de la lumière.

7Veuillez respecter strictement les instructions d'utilisation, la détermination des résultats de l'essai doit prendre le lecteur de plaque de microtiter comme norme.

8Les échantillons, le tampon de lavage et chaque type de déchets doivent être selon le procédé du matériau infectieux.

9Ne mélangez pas les réactifs avec ceux des autres lots.