Kit de test de l'irisine humaine ELISA

Utilisation prévue

Ce kit permet de déterminer les concentrations d' irisine dans le sérum humain, le plasma et d' autres fluides biologiques.

Procédure d'évaluation

1.Diluer et ajouter l'échantillon:Diluer Densité initiale Norme comme indiqué dans le tableau suivant:

2.ajouter l'échantillon:Mettre les puits vides séparément (les puits de comparaison vides n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif HRP-Conjugate, autrement chaque étape de l'opération est la même).Ajouter 50 μl de norme à la stripplate de Microelisa, ajouter 40 μl de dilution de l'échantillon au puits de l'échantillon d'essai, puis ajouter l'échantillon d'essai de 10 μl (la dilution finale de l'échantillon est de 5 fois), ajouter l'échantillon aux puits, ne pas toucher la paroi du puits autant que possible, et mélanger doucement.

3.Incubation: après fermeture de la plaque avec une membrane de la plaque de fermeture, incubation pendant 30 min à 37°C.

4.Configurer le liquide: solution de lavage 30 fois (ou 20 fois) diluée 30 fois (ou 20 fois) avec de l'eau distillée et de la réserve.

5.lavage: Découvrir la membrane de la plaque de fermeture, jeter le liquide, sécher par balancement, ajouter du tampon de lavage à chaque puits, rester immobile pendant 30 secondes, puis drainer, répéter 5 fois, sécher par tapotement.

6.ajouter une enzyme:ajouter 50 μl de réactif HRP-conjugué à chaque puits, sauf puits vierge.

7.incubation: Opération avec 3.

8.lavage: Opération avec 5.

9.couleur: Ajouter à chaque puits la solution de chromogène A 50ul et la solution de chromogène B 50ul, éviter la conservation de la lumière pendant 10 min à 37°C

10Arrêtez la réaction: Ajoutez 50 μl de solution d'arrêt à chaque puits, arrêtez la réaction ((la couleur bleue change de couleur jaune).

11.essai:prendre le puits vide à zéro, lire l'absorbance à 450 nm après ajout de la solution stop et dans les 15 min.

Exigences relatives aux échantillons

1.extraire le plus tôt possible après la collecte des spécimens et selon la littérature pertinente, et doit être expérimenté le plus tôt possible après l'extraction.l'échantillon peut être conservé à -20 °C pour préserverÉvitez les cycles de congélation et de décongélation répétés.

2"Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe l'activité du HRP.

3.extraire le plus tôt possible après la collecte des spécimens et selon la littérature pertinente, et doit être expérimenté le plus tôt possible après l'extraction.l'échantillon peut être conservé à -20 °C pour préserverÉvitez les cycles de congélation et de décongélation répétés.

4- Impossible de détecter l'échantillon contenant du NaN3, car le NaN3 inhibe l'activité du HRP.

Notes importantes

• Le kit est retiré du réfrigérateur et doit être maintenu en équilibre pendant 15 à 30 minutes à température ambiante, les plaques ELISA recouvertes si elles n'ont pas été usées après ouverture.la plaque doit être conservée dans un sac scellé.
• Le buffer de lavage va séparer la cristallisation, il peut être chauffé l'eau aide à se dissoudre quand dilué.
• Ajoutez l'échantillon avec un échantillonneur à chaque étape, et corrigez sa précision fréquemment, évitant l'erreur expérimentale. ajoutez l'échantillon dans les 5 min, si le nombre d'échantillons est beaucoup, recommandons d'utiliser Volley.
• si la teneur en matière d'essai est excessivement élevée (l'OD de l'échantillon est supérieure au premier puits standard ), veuillez diluer l'échantillon (n fois), veuillez diluer et multiplier par le facteur de dilution.(×n×5).
• La membrane de la plaque de fermeture limite uniquement l'utilisation à usage unique, afin d'éviter la contamination croisée.
• Le substrat évite la conservation de la lumière.
• Veuillez respecter strictement les instructions d'utilisation.
• Tous les échantillons, le tampon de lavage et chaque type de déchets doivent être selon le procédé du matériau infectieux.
• Ne mélangez pas les réactifs avec ceux d'autres lots.