Kit Elisa du groupe RUO HBcAb

Le test ELISA RUO HBcAb est destiné à la détection qualitative des anticorps contre l'antigène de base du virus de l'hépatite B dans le sérum/plasma humain.

Faisant partie de la famille des Hepadnaviridae, le VHB est un virus à double brin d'ADN enveloppé qui est la principale cause de transmission de l'hépatite par le sang.Les effets de l'infection par le VHB vont de l'hépatite légère à sévère.Pour classer l'infection par l'hépatite B, il est nécessaire d'établir une classification de l'infection par l'hépatite B, qui comprend les problèmes hépatiques chroniques, tels que le carcinome et la cirrhose.les marqueurs sérologiques doivent être identifiés pendant les trois phases de l'infection - incubationLe principal composant du virus est l'antigène de base de l'hépatite B (HBcAg).Cet antigène du noyau est constitué d'un seul polypeptide d'environ 17 kD qui est déchargé lors de la désagrégation des particules du noyau.. Au moins un déterminant immunologique est présent dans l'antigène. Peu de temps après l'apparition de l'HBsAg, des anticorps contre l'HBcAg (anticorps totaux anti-HBc et IgM) apparaissent et ne disparaissent jamais.,Une infection par l'hépatite B peut être contractée sans anti-HBc immunologiquement détectable.Le dépistage des anticorps anti-HBc donne des données sur la prévalence de l'hépatite B dans différentes populationsL'identification de l'anti-HBc est vitale lors du diagnostic dans un cadre clinique.En association avec d' autres tests d' hépatite B, le marqueur anti-HBc permet un diagnostic correct et un suivi adéquat de la progression du virus.L' anti-HBc peut éventuellement être le seul indicateur d' une infection par l' hépatite B (y compris d' autres tests sur des patients HBsAg négatifs).

Matériaux et composants

Pour le traitement de l'hypertension:Des bandes de micro-puits vierges fixées sur un support de bande blanche. La plaque est scellée dans un sac en aluminium avec un sécheur. Chaque puits contient du HBcAg purifié. Les bandes de micro-puits peuvent être brisées pour une utilisation séparée.Placer les puits ou bandes non utilisés dans le sac de stockage scellant en plastique fourni avec le sécheur et remettre à 2-8°CUne fois ouvert, stable pendant un mois à 2 à 8°C.

Contrôle négatif:1 x 1, 0 ml par flacon) conserver.00,1% ProClinTM 300 Liquide jaunâtre rempli dans un flacon avec un capuchon à vis vert. tampon stabilisé par protéine testé non réactif pour HBcAb. Prêt à utiliser comme fourni. Une fois ouvert, stable pendant un mois à 2-8°C.

Contrôle positif:1 x 1, 0 ml par flacon) conserver.00,1% ProClinTM 300 Liquide de couleur rouge rempli dans un flacon avec un capuchon à vis rouge. HBcAb dilué dans un tampon stabilisé en protéines. Prêt à utiliser comme fourni. Une fois ouvert, stable pendant un mois à 2-8°C.

Conjugaison:1 x 6 ml par flacon) conserver.00,1% ProClinTM 300 Liquide de couleur rouge dans un flacon blanc avec un capuchon à vis rouge.stable pendant un mois à 2-8°C.

Le tampon de lavage:Diluer avant utilisation! détergent Tween-20 Liquide incolore rempli dans une bouteille blanche avec un bouchon à vis blanc.PH 7.4, 20 × PBS Le concentré doit être dilué1 à 19Une fois dilué, stable pendant une semaine à température ambiante ou pendant deux semaines lorsqu'il est conservé à 2 à 8°C.

Le sous-ensemble A:(1x6 ml par flacon) Liquide incolore rempli dans un flacon blanc avec un capuchon à vis vert.

Substrate B:(1x6 ml par flacon) Liquide incolore rempli dans un flacon noir avec un capuchon à vis noir.TMB (tétraméthylbenzidine) solution prête à l'emploi comme fournie. Une fois ouverte, stable pendant un mois à 2-8°C.

Arrêtez la solution:(1x6 ml par flacon) Liquide incolore dans un flacon blanc avec un capuchon à vis blanc.₂Alors₄Une fois ouvert, stable pendant un mois à 2-8°C.

Sacs en plastique scellés:Pour la fixation des bandes non utilisées 1 unité

INSERT du conditionnementUne copie

Couverture en carton2 feuilles

Pour couvrir les plaques pendant l'incubation et empêcher l'évaporation ou la contamination des puits.

Procédure

Préparation des réactifs:Laisser les réactifs atteindre la température ambiante (18-30°C).Utiliser de l'eau distillée ou désionisée et uniquement des récipients propres pour diluer le tampon. Tous les autres réactifs sontPrêt à être utilisé tel qu'il est fourni.

1. Préparation:Formuler les puits des microplaques pour les échantillons de contrôle et de patient à analyser. Remplacer les bandes de micro-puits non utilisées dans le joint de la poche en aluminium et les conserver à 2-8°C.
2. Ajout d' échantillon:Ajouter 50 μl du témoin ou des échantillons dans le puits désigné.
3. Ajout de conjugaison:Ajouter 50 μl deConjugaisondans tous les puits sauf le Blank.
4. En période d'incubationCouvrir la plaque avec le couvercle de la plaque et incuber pendant 30 minutesà 37 °C.
5. Le lavage:À la fin de l'incubation, retirez et jetez le couvercle de la plaque. Lavez chaque puits 5 fois avec un tampon de lavage dilué. Chaque fois, laissez les puits se tremper pendant 30 à 60 secondes.Après le dernier cycle de lavage, tournez la plaque sur du papier ou une serviette propre et appuyez dessus pour enlever les résidus.
6. Ajout de substrat:Ajouter 50 μl de solution de substrat A et 50 μl de solution de substrat B dans chaque puits.10 minutesà 37°C en évitant la lumière.
7. Ajout d'une solution d'arrêt:À l'aide d'une pipette multicanal ou manuellement, ajoutez50μJe...de Stop Solution dans chaque puits et mélanger doucement.
8. Mesure de l'absorbance:Calibrez le lecteur de plaque avec le puits à vide et lisez l'absorbance à450 nmSi un instrument à double filtre est utilisé, régler la longueur d'onde de référence à630 nm. Calculer la valeur limite et évaluer les résultats. (Note: le numéro de sérielire l'absorbance dans10 minutesaprès l'arrêt de la réaction).