Kit ELISA contre le VHC

Immunoassay enzymatique pour la détection d'anticorps contre le virus de l'hépatite humaine de type C (VHC) RUO

Virus de l'hépatite C (VHC), qui était auparavant décrite comme la forme parentérale de l'hépatite non A, non B (NANBH)¹, devient une maladie chronique dans 50% des cas.²Le VHC peut également être transmis par l'usage de drogues par voie intraveineuse et par contact domestique.³Le virus de l'hépatite C est un virus à ARN à un seul brin avec certaines relations structurelles à la famille des flavivirus.Les séquences d'acides nucléiques de clones d'ADNc du VHC ont fourni la base pour la construction de peptides recombinants représentant des protéines présumées du virus de l'hépatite C.^4,5Test de dépistage des anticorps du virus de l'hépatite C dans le sang à l'aide de protéines synthétiques ou recombinantes,a aidé à identifier des donneurs de sang apparemment en bonne santé avec des anticorps anti-HCV qui auraient pu transmettre le virus.⁶

Il s' agit d' un test immunosorbant lié à l' enzyme utilisant des protéines recombinantes dérivées de régions centrales du virus du VHC pour détecter la présence d' anticorps du VHC dans le sérum humain.

Matériaux fournis avec les kits:

Procédure d'évaluation

Il est fortement recommandé d'analyser chaque échantillon et chaque témoin en double.

1. Distribuer 100 ml ((ou 3 gouttes) de diluant de l'échantillon dans des puits d'essai individuels.
2. Distribuer 100 ml de témoins positifs et de témoins négatifs en doublons dans des puits individuels.
3. Ajouter 10 ml de chaque échantillon à des puits d'essai en double; tourbillon à mélanger.
4. Incubation pendant 30 minutes à 37 °C
5. Lavez chaque puits 5 fois en remplissant chaque puits de tampon de lavage dilué, puis inversez vigoureusement la plaque pour faire sortir toute l'eau et bouchez le bord des puits sur du papier absorbant pendant quelques secondes.
6. Ajoutez 100 ml d' Enzyme Conjugate à chaque puits, mélangez-le doucement en faisant tourner la plaque de microtiter sur un banc plat pendant 1 minute.N' ajoutez pas d' Enzyme Conjugate au puits vide.
7. Incubation pendant 20 minutes à 37 °C
8. Lavez l' assiette 5 fois à l'étape 5.
9. Ajouter une goutte (50 ml) de solution de substrat A (substrate HRP) à chaque puits, puis ajouter une goutte (50 ml) de solution de substrat B (TMB) à chaque puits. .
10. Ajouter une goutte (50 ml) de solution d'arrêt à chaque puits pour arrêter la réaction de couleur.Il est possible de lire la valeur OD à 450 nm avec un seul lecteur de plaque filtrante.. (en utilisant la valeur OD du puits vide pour corriger toutes les lectures OD de tous les puits)