Méthode gamma murine de Kit Mouse Interferon Gamma Sandwich d'essai d'Ifn RUO

Γ d'interféron de souris ; Interféron gamma ; IFN-γ ; IFN-gamma ; IFNG ; ELISA Kit

Pour la détermination in vitro quantitative des concentrations de γ d'interféron (IFN-γ) en sérum de souris, plasma, milieux de culture ou tout fluide biologique.

Principe

Ce kit d'ELISA emploie le sandwich-ELISA comme méthode. Le stripplate de Microelisa fourni dans ce kit a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps spécifique à IFN-γ. Des normes ou les échantillons sont ajoutés aux puits appropriés de stripplate de Microelisa et ont combiné à l'anticorps spécifique. Puis une peroxydase de raifort (HRP) - anticorps conjugué spécifique pour IFN-γ est ajoutée à chaque stripplate de Microelisa bien et incubée. Des composants libres sont enlevés. La solution de substrat de TMB est ajoutée à chaque puits. Seulement ces puits qui contiennent IFN-γ et anticorps d'IFN-γ conjugué par HRP sembleront bleus en couleurs et puis tourneront jaune après l'addition de la solution d'arrêt. La densité optique (OD) est mesurée spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nanomètre. La valeur d'OD est proportionnelle à la concentration d'IFN-γ. Vous pouvez calculer la concentration d'IFN-γ dans les échantillons en comparant l'OD des échantillons à la courbe standard.

Matériaux équipés de kit

• Dilution des normes

Dix puits sont placés pour des normes dans un stripplate de Microelisa. Dans bien 1 et bien 2, la solution étalon 100μl et le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et mélangés bien. Dans bien 3 et bien 4, la solution 100μl bien de 1 et bien 2 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. la solution 50μl est jetée du puits 3 et bien 4. Dans bien 5 et bien 6, la solution 50μl bien de 3 et bien 4 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. Dans bien 7 et bien 8, la solution 50μl bien de 5 et bien 6 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. Dans bien 9 et bien 10, la solution 50μl bien de 7 et bien 8 sont ajoutées respectivement. Le tampon standard de la dilution 50μl sont ajoutés et bien alors mélangés. la solution 50μl est jetée du puits 9 et bien 10. Après dilution, tout le volume dans tous les puits sont 50μl et les concentrations sont 180 pg/ml, 120pg/ml, 60 pg/ml, 30pg/ml et 15 pg/ml, respectivement.

Calcul des résultats

Des concentrations connues de la norme et de sa lecture correspondante OD d'IFN-γ de souris est tracées sur l'échelle de rondin (axe des abscisses) et l'échelle de rondin (axe des y) respectivement. La concentration de la souris IFN-γ dans l'échantillon est déterminée par la traçage l'O.D. de l'échantillon sur l'axe des y. La concentration originale est calculée en multipliant le facteur de dilution.

Précision

précision d'Intra-analyse (précision dans une analyse) : 3 échantillons avec la basse, moyenne et de haut niveau souris IFN-γ ont été examinés 20 fois d'un plat, respectivement.

précision d'Inter-analyse (précision entre les analyses) : 3 échantillons avec la basse, moyenne et de haut niveau souris IFN-γ ont été examinés de 3 plats différents, 8 répliques dans chaque plat.

Cv (%) = SD/meanX100

Intra-analyse : Cv<10>

Inter-analyse : Cv<12>

Chaîne d'analyse

3pg/ml-200 pg/ml

Sensibilité :

0.8pg/ml