Kit d'essai de Tg ab d'anti de thyroglobuline de BIOVANTION anti essai d'anticorps

ESSAI KIT Thyroglobulin Ab d'Anti-Tg ELISA

1. Utilisation prévue

Immunoessai pour la détermination quantitative in vitro des anticorps à la thyroglobuline en sérum humain. L'anti détermination de Tg de ‐ est employée comme aide dans la détection des maladies thyroïdiennes autoimmunes.

2. Résumé

La thyroglobuline (Tg) est produite dans la glande thyroïde et est une composante principale dans le lumen de la follicule thyroïde. Dans la synergie avec de la peroxydase spécifique de ‐ thyroïde d'enzymes (TPO), le Tg a une fonction essentielle dans l'iodation de L tyrosine de ‐ et dans la formation des hormones thyroïdiennes T4 et T3. Les Tg et les TPO sont potentiellement autoantigenic.

Des concentrations élevées en sérum des anticorps contre Tg (autoantibodies de ‐ de Tg) sont trouvées dans les sujets avec le ‐ d'autoimmunité ont basé la thyroïdite. Les fortes concentrations de l'anti ‐ Tg ainsi que l'anti ‐ TPO sont indicatives de la thyroïdite infiltrative de ‐ lymphocytique chronique (la maladie de Hashimoto). La fréquence des anticorps de thyroglobuline est approximativement 70 le ‐ 80 % dans les sujets avec la thyroïdite autoimmune de ‐, y compris la maladie de Hashimoto, et approximativement 30 % dans les personnes avec la maladie de tombes. L'anti analyse de Tg de ‐ est importante pour l'usage en surveillant le cours de la thyroïdite de Hashimoto et pour le diagnostic différentiel (cas de la thyroïdite autoimmune suspectée d'origine inconnue avec d'anti résultats d'essai négatifs de ‐ TPO, la maladie de tombes sans infiltration lymphocytique, et pour éliminer l'interférence par des autoantibodies de ‐ de Tg dans l'essai de Tg).

Bien que la sensibilité de la procédure puisse être augmentée en déterminant simultanément les anticorps supplémentaires thyroïde (anti ‐ TPO, des anticorps de ‐ de récepteur de ‐ de TSH), un résultat négatif n'élimine pas définitivement la présence d'une maladie auto-immune. Le niveau du titre d'anticorps ne se corrèle pas avec l'activité clinique de la maladie. Les titres qui sont élevés au commencement peuvent devenir négatifs si la maladie persiste pendant une plus longue période ou si

la remise se produit. Si les anticorps réapparaissent après remise, une rechute est probable.

L'enzyme a lié des analyses d'immunosorbant emploie les anticorps humains d'IgG d'antihuman d'antigène et de lapin (anti-IgG).

les matériaux 3.Reagents ont fourni

• Microplate enduit, 8 X12 bandes, 96 puits. Enduit d'un préenduisage avec de l'antigène humain de TG.

• Calibreurs, 6 fioles, 1 ml chacun, prêtes à employer ; Concentrations : 0 (A), 50 (B), 150 (C), 500 (D), 1000 (E) et 2000 (F) IU/mL.

• Conjugué d'enzymes, 1 fiole, 11,0 ml d'anticorps anti- humains marqués d'IgG de lapin de HRP (peroxydase de raifort) (anti-IgG) dans le tampon Tris-NaCl contenant BSA (albumine de sérum de boeuf). Contient 0,1% agents de conservation ProClin300.

• Diluant de sérum : 1 fiole, 11mL. Contenir des sels de tampon et un colorant

• Concentré de solution de lavage, 1 fiole, 25 ml (40X s'est concentré), solution de lavage de PBS-tween.

• Substrat, 1 fiole, 11ml, prêt à employer, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Arrêtez la solution, 1 fiole, 6,0 ml de 1 mole/l d'acide sulfurique.

• IFU, 1 copie.

• Couvercle de plat : 2 morceaux.

4. Matériaux exigés (mais non fourni)

• Lecteur de Microplate avec la capacité absorbante de la longueur d'onde 450nm et 620nm.
• Joint de Microplate.
• Incubateur.
• Dispositif trembleur de plat.
• Micropipettes et micropipettes multicanales livrant 50µl avec une précision de meilleur que 1,5%.
• Papier absorbant.
• Eau distillée

5. Procédure d'essais

• Employez seulement le nombre de puits requis et composez les puits de microplate pour qu'on analyse chaque calibreur et échantillon.

• Ajoutez le µL 100 des calibreurs à chaque puits.

• Ajoutez le µL 100 du diluant témoin (couleur verte) à chaque puits excepté les Calibreur-puits.

• Ajoutez le µL 10 de l'échantillon à chaque puits de diluant témoin (NOTE : Les réactifs en Wells tourneront la couleur bleue du vert), puis secouent 30 secondes.

• Couvrez le plat de couvercle de plat et incubez au °C 37 pendant 30 minutes.

• Jetez le contenu du plat micro par la décantation ou l'aspiration. Si décantant, tapez et épongez le sec de plat avec le papier absorbant.

• Ajoutez le µL 350 de la solution de lavage, le décantez (robinet et tache) ou l'aspirez. Répétez 4 fois supplémentaires pour un total de 5 lavages. À la fin du lavage, inversez le plat et tapez n'importe quelle solution résiduelle de lavage sur le papier absorbant.

• Ajoutez le µL 100 du conjugué d'enzymes,

• Couvrez le plat de couvercle de plat et incubez au °C 37 pendant 30 minutes

• Ajoutez le µL 350 de la solution de lavage, le décantez (robinet et tache) ou l'aspirez. Répétez 4 fois supplémentaires pour un total de 5 lavages. À la fin du lavage, inversez le plat et tapez n'importe quelle solution résiduelle de lavage sur le papier absorbant.

• Ajoutez le µL 100 du substrat à chaque puits. Couvrez et incubez à la température ambiante (18-25℃) dans l'obscurité pour la réaction pendant 10 minutes. Ne secouez pas le plat après addition de sous-état.

• Ajoutez le µL 50 de la solution d'arrêt à chaque puits.

• Secouez pendant 15-20 secondes pour mélanger le liquide dans les puits. Il est important de s'assurer que les changements de couleur bleus à jaunir complètement.

• Lisez l'absorbance de chaque puits à 450 nanomètre (utilisant 620 à 630 nanomètre comme longueur d'onde de référence pour réduire au minimum des imperfections bonnes) dans un lecteur micro de plat. Les résultats devraient être lus d'ici 30 minutes de s'ajouter arrêtent la solution.