Thrombomodulin humain TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Thrombomodulin humain, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit For Research Use

Thrombomodulin humain, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Matériaux équipés de kit

Principe

Ce kit d'ELISA emploie le sandwich-ELISA comme méthode. Le stripplate de Microelisa fourni dans ce kit a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps spécifique au thrombomodulin. Des normes ou les échantillons sont ajoutés aux puits appropriés de stripplate de Microelisa et ont combiné à l'anticorps spécifique. Puis une peroxydase de raifort (HRP) - anticorps conjugué spécifique pour le thrombomodulin est ajoutée à chaque stripplate de Microelisa bien et incubée. Des composants libres sont enlevés. La solution de substrat de TMB est ajoutée à chaque puits. Seulement ces puits qui contiennent le thrombomodulin et le HRP ont conjugué l'anticorps de thrombomodulin sembleront bleus en couleurs et puis tourneront jaune après l'addition de la solution d'arrêt. La densité optique (OD) est mesurée spectrophotométriquement à une longueur d'onde de 450 nanomètre. La valeur d'OD est proportionnelle à la concentration du thrombomodulin. Vous pouvez calculer la concentration du thrombomodulin dans les échantillons en comparant l'OD des échantillons à la courbe standard.

Préparation témoin

1. préparation de sérum

Après la collection du sang total, permettez au sang de coaguler en le laissant calme à la température ambiante. Ceci prend habituellement 10-20 minutes. Enlevez le caillot par la centrifugation à 2,000-3,000 t/mn pendant 20 minutes. Si les précipités apparaissent pendant la réservation, l'échantillon devrait centrifugated encore.

2. préparation de plasma

Rassemblez le sang total dans des tubes avec l'anticoagulant (EDTA ou citrate). Après incubé à la température ambiante pendant 10-20 minutes, des tubes centrifugated pour la minute 20 à 2,000-3,000 t/mn. Rassemblez le surnageant soigneusement comme échantillons de plasma. Si les précipités apparaissent pendant la réservation, l'échantillon devrait centrifugated encore.

3. Échantillons d'urine

Prélevez l'urine dans les tubes aseptiques. Rassemblez le surnageant soigneusement après centrifugation pour la minute 20 à 2,000-3,000 t/mn. Si les précipités apparaissent pendant la réservation, l'échantillon devrait centrifugated encore. La procédure de préparation du fluide céphalo-rachidien et du fluide pleuroperitoneal est identique que celle de l'échantillon d'urine.

4. Échantillons de cellules

Si vous voulez détecter les sécrétions des cellules, rassemblez le surnageant de culture dans les tubes aseptiques. Rassemblez le surnageant soigneusement après centrifugation pour la minute 20 à 2,000-3,000 t/mn. Si vous voulez détecter les composants intracellulaires, diluez les cellules à 1X106/ml avec PBS (pH 7.2-7.4). Les cellules ont été détruites pour libérer les composants intracellulaires par la congélation répétée et le dégel. Rassemblez le surnageant soigneusement après centrifugation pour la minute 20 à 2,000-3,000 t/mn. Si les précipités apparaissent pendant la réservation, l'échantillon devrait centrifugated encore.

5. prélèvements de tissu

Des prélèvements de tissu sont coupés, pesés, gelés en azote liquide et stockés à -80℃ pour une utilisation future. Les prélèvements de tissu ont été homogénéisés après avoir ajouté PBS (pH 7,4). Des échantillons devraient être actionnés à 4℃. Rassemblez le surnageant soigneusement après centrifugation pour la minute 20 à 2,000-3,000 t/mn. Partie aliquote le surnageant pour l'analyse d'ELISA et le futur usage.

Notes :

• L'extraction témoin et l'analyse d'ELISA devraient être exécutées dès que possible après collection témoin. Les échantillons devraient être extraits selon la littérature appropriée. Si l'analyse d'ELISA ne peut pas être exécutée immédiatement, des échantillons peuvent être stockés à -20℃.Repeated des cycles que gel-dégel devraient être évités.
• Nos kits ne peuvent pas être employés pour des échantillons avec NaN3 qui peut empêcher l'activité de HRP.