Essai de sérum de la thyroxine T4 Elisa Test Free T4 d'OIN 110 minutes lues temps

Thyroxine T4
Référence : Essais DS177703 96

1. Utilisation prévue
Immunoessai pour la détermination quantitative in vitro de la thyroxine en sérum humain.

2. Résumé
La thyroxine d'hormone (T4) est le produit principal sécrété par la glande thyroïde et est un composant intégral du système de réglementation pituitaire-thyroïde hypothalamus-antérieure. Elle a la fonction d'influencer anabolique le métabolisme. La thyroxine est formée dans une réaction d'accouplement de deux molécules de DIT (3,5-diiodotyrosine) dans la glande thyroïde. C'est limite stockée à la thyroglobuline dans le lumina des follicules thyroïde et est sécrété de la manière prescrite sous l'influence de TSH. (1, 2) la partie principale (> 99 %) de thyroxine totale (T4) en sérum est présente en protéine ? forme de limite. Pendant que les concentrations des protéines de transport en sérum sont sujettes à des effets exogènes et endogènes, le statut des protéines obligatoires doit également être pris en considération dans l'évaluation de la concentration en hormone thyroïdienne en sérum. Si ceci est ignoré, des changements des protéines obligatoires (par exemple en raison de l'oestrogène ? contenir des préparations, pendant la grossesse ou en présence d'un syndrome nephrotique etc.) peut mener aux évaluations incorrectes de l'état métabolique thyroïde. (3, 4, 5, 6, 7) la détermination de T4 peut être utilisée pour les indications suivantes : la détection de l'hyperthyroïdisme, la détection de l'hypothyroïdisme primaire et secondaire, et la surveillance de la thérapie de TSH-suppression. (8)
L'analyse T4 utilise un principe concurrentiel d'essai avec de l'anticorps spécifiquement dirigé contre T4. T4 endogène, libéré par l'action de l'acide sulfonique de 8 anilino-1-naphthalene (american national standard).

3. Les matériaux de réactifs ont fourni
• Microplate enduit, 8 X12 bandes, 96 puits, enduits d'un préenduisage avec T4 derivant.
• Calibreurs, 6 fioles, 1 ml chacun, prêtes à employer ; Concentrations : 0 (A), 2,5 (B), 5 (C), 10 (D), 15 (E) et 30 (F) μg/dL.
• Le conjugué d'enzymes, 1 fiole, 6,0 ml de HRP (peroxydase de raifort) a marqué la souris T4 monoclonal dans le tampon Tris-NaCl contenant BSA (albumine de sérum de boeuf). Contient 0,2% agents de conservation ProClin300. American national standard 1,5 mg/ml.
• Substrat, 1 fiole, 11ml, prêt à employer, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Arrêtez la solution, 1 fiole, 6,0 ml de 1 mole/l d'acide sulfurique.
• Concentré de solution de lavage, 1 fiole, 25 ml (40X s'est concentré), solution de lavage de PBS-tween.
• IFU, 1 copie.
• Couvercle de plat : 1 morceau.

4. Matériaux exigés (mais non fourni)
• Lecteur de Microplate avec la capacité absorbante de la longueur d'onde 450nm et 620nm.
• Joint de Microplate.
• Incubateur.
• Dispositif trembleur de plat.
• Micropipettes et micropipettes multicanales livrant 50μl avec une précision de meilleur que 1,5%.
• Papier absorbant.
• Eau distillée

Procédure d'essais

Assurez que les échantillons, les calibreurs, et les contrôles des patients sont à la température ambiante (℃ 18-25) avant la mesure. Mélangez tous les réactifs en inversant doucement avant l'utilisation.

• Employez seulement le nombre de puits requis et composez les puits des microplates pour qu'on analyse chaque calibreur et échantillon. • Ajoutez le µL 50 des calibreurs ou des échantillons à chaque puits.

• Ajoutez le µL 50 du conjugué d'enzymes à chaque puits.

• Secouez le microplate doucement pendant 30 secondes pour se mélanger.

• Couvrez le plat de couvercle de plat et incubez au ℃ 37 pendant 60 minutes.

• Jetez le contenu du plat micro par la décantation ou l'aspiration. Si décantant, tapez et épongez le sec de plat avec le papier absorbant.

• Ajoutez le µl 350 de la solution de lavage, le décantez (robinet et tache) ou l'aspirez. Répétez 4 fois supplémentaires pour un total de 5 lavages. Un joint automatisé de bande de microplate peut être employé. À la fin du lavage, inversez le plat et tapez n'importe quelle solution résiduelle de lavage sur le papier absorbant.

• Ajoutez le µL 100 du substrat à chaque puits.

• Couvrez et incubez à la température ambiante (18-25℃) dans l'obscurité pour la réaction pendant 20 minutes. Ne secouez pas le plat après addition de sous-état. • Ajoutez le µL 50 de la solution d'arrêt à chaque puits.

• Secouez pendant 15-20 secondes pour mélanger le liquide dans les puits. Il est important de s'assurer que les changements de couleur bleus à jaunir complètement.

• Lisez l'absorbance de chaque puits à 450 nanomètre (utilisant 620 à 630 nanomètre comme longueur d'onde de référence pour réduire au minimum des imperfections bonnes) dans un lecteur micro de plat. Les résultats devraient être lus d'ici 30 minutes de s'ajouter arrêtent la solution