Spécimen d'EBV-VCA IgA Ab Test ELISA Kit Enzyme Immunoassay Test Plasma

EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit Catalog No. : BE501A
Immunoessai d'enzymes pour la détection de l'anticorps d'IgA à l'antigène viral de capsid (VCA) du virus d'Epstein-Barr (EBV).
 
1. PRINCIPE DE L'ANALYSE
L'EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit utilise un système de détection où des puits de microplate sont enduits de l'antigène de recombinaison correspondant à un segment fortement antigénique EBV-VCA. Des spécimens de sérum ou de plasma, contrôles sont ajoutés aux puits. Pendant l'incubation, les anticorps d'IgA spécifiques pour le présent d'EBV-VCA dans le spécimen lieront à l'antigène de recombinaison fixe sur les puits de microplate. Les puits sont lavés pour enlever les matériaux non liés, et le conjugué anti-humain de peroxydase d'IgA liera au complexe d'antigène-anticorps et des conjugués non liés excédentaires d'enzymes sont de nouveau enlevés par le lavage. Enzyme/substrate, le tetramethylbenzidine (TMB), est ajoutée lors de l'incubation que le substrat sera hydrolysé par l'enzyme attachée et une couleur bleue ou bleu-vert se développe dans les puits contenant des anticorps d'EBV-VCA IgA. La réaction enzymique est arrêtée par l'addition de l'acide sulfurique. L'intensité de couleur développée est lue spectrophotométriquement à 450nm (450 nm/630 nanomètre) et est proportionnelle à la quantité d'anticorps actuels dans le spécimen.
RÉACTIFS
 
2. Matériaux équipés de kits :

 
3. PROCÉDURE D'ANALYSE

1. Amenez ELISA Kit (tous les réactifs), et les spécimens à la température ambiante avant emploi (approximativement 30 minutes).
2. 1h19 de tampon de lavage concentré Dilute avec ddH2O. Par exemple, 5 ml de concentré de tampon de lavage devraient être dilués à un volume total de 100 ml avec désionisé ou eau distillée.
3. Pour chaque essai, en blanc de l'ensemble un bien comme contrôle de fond, deux contrôles positifs et trois négatifs. Distribuez le contrôle 100ml positif et le double négatif de contrôle dans différents puits. Ni des échantillons ni le HRP-conjugué ne devraient être bien ajoutés dans le blanc.
4. Distribuez 100ml de dilution d'échantillon dans des puits d'essai individuel excepté les contrôles.
5. Ajoutez 10ml de chaque échantillon d'essai dans les puits d'essai ; vortex à mélanger.
6. Incubez pendant 30 minutes à 37°C
7. Lavez chacun bien 5 fois en remplissant chaque puits de tampon dilué de lavage, puis en inversant le plat vigoureusement pour obtenir toute l'eau et en bloquant la jante des puits sur le papier absorbant pendant quelques secondes.
8. Ajoutez 100ml de conjugué d'enzymes à chaque puits. Mélangez-le doucement en tourbillonnant le plat de microtitre sur le banc plat pendant les minutes 1. N'ajoutez pas le conjugué d'enzymes au blanc bien.
9. Incubez pendant 20 minutes à 37°C
10. Lavez le plat 5 fois comme étape 7.
11. Ajoutez une goutte (50ml) de la solution A (HRP-substrat) de substrat à chaque puits, puis ajoutez une goutte (50ml) de la solution B (TMB) de substrat à chaque puits. Mélangez doucement et incubez à 37°C pendant 30 minutes.
12. Ajoutez une goutte (50ml) de solution d'arrêt à chaque puits pour arrêter la coloration. Lisez la valeur d'OD à 450 nm/630 nanomètre avec le double lecteur de plat de filtre. C'est option pour lire la valeur d'OD à 450 nanomètre avec le lecteur simple de plat de filtre. (utilisant la valeur d'OD du puits vide pour corriger toute la lecture d'OD de tous les puits)