Marqueurs tumoraux de l'antigène carbohydrate 153 (CA153)

Utilisation prévue

Kit de détection de l'antigène carbonique 15-3 (CA153) (ELISA). Il est utilisé dans les tests quantitatifs de CA15-3 dans le sérum humain.

Résumé et signification clinique

L'antigène carbohydrate 15-3 (CA15-3) est un fragment d'épitope MUC-1 d'une cellule cancéreuse du sein, qui est une glycoprotéine..Le CA15-3 est utilisé pour déterminer la progression et les métastases du cancer du sein, ainsi que pour le traitement clinique et la rechute en clinique.les lésions métastatiques du cancer du sein peuvent être considéréesLorsque le traitement est efficace, les concentrations de CA15-3 ont été significativement diminuées chez environ 50% des patients;La concentration de CA15-3 est plus sensible que les critères radiologiques et cliniques dans 96% des cas de récidive localeCe réactif est principalement utilisé pour la surveillance dynamique des patients cancéreux afin de déterminer la progression de la maladie ou l'effet thérapeutique auxiliaire, mais sa concentration n'est pas corrélée à la taille de la tumeur,la croissanceDans certaines maladies bénignes (comme la maladie bénigne du sein, la cirrhose, l'hépatite, etc.) on peut également voir que l'indice a augmenté à des degrés divers.C'est pourquoi, le CA15-3 ne doit pas être considéré comme un test de dépistage général efficace pour le dépistage du cancer, le diagnostic précoce et d'autres fins.

Principe

Pour mesurer les niveaux de CA15-3 dans le sérum, des puits en plastique revêtus d'un anticorps monoclonal de CA15-3 sont fournis dans le kit.L'échantillon du patient est ajouté et, pendant l'incubation, le CA15-3, s'il est présent, est fixé à l'anticorps en phase solide, lorsque le mono-anticorps marqué par HRP est ajouté, créant un anticorps HRP-CA15-3 “sandwich”.Après ajout du substrat TMB, le résultat est obtenu par le lecteur de plaque d'EIE.

Réactifs fournis

Microplate revêtue: 1 plaque (8 × 12 puits), prête à l'emploi. recouverte d'un anticorps anti-CA15-3 et scellée dans un sac en aluminium. Retirez les bandes dans le sac recouvreable avec un sécheur pour les protéger de l'humidité après ouverture.Conserver à 2 à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Conjugé HRP:1 flacon de 11 ml, prêt à l' utilisation, contenant du conservateur anti-CA15-3 et proclin-300 marqué HRP, conservé à 2 à 8°C jusqu' à la date de péremption.

Dilution de l'échantillon: 1 flacon de 11 ml, prêt à l' utilisation, conservé à 2 à 8°C jusqu' à la date de péremption.

Le calibreur:5 flacons de 0,5 ml, prêts à l' utilisation, étiquetés avec S0 à S4 et la concentration de CA-15-3 est de 0,15,40,100Conserver à 2 à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Le contrôle:1 flacon de 0,5 ml, prêt à l'emploi, conservé à 2 à 8°C jusqu'à la date de péremption.

Chromogène A:1 flacon de 7 ml, prêt à l' utilisation, contenant de l' H2O2, conservé à 2 à 8°C jusqu' à la date de péremption.

Chromogène B:1 flacon de 7 ml, prêt à l' utilisation, contenant du TMB, conservé à 2 à 8°C jusqu' à la date de péremption.

Arrêtez la Solution:1 flacon de 7 ml, prêt à l' utilisation, contenant du H2SO4, conservé à 2 à 8°C jusqu' à la date de péremption.

Puffer de lavage:1 flacon de 15 ml, concentré 20 fois, dilué avec de l'eau désionisée avant l'essai, contenant du NaCl, du phosphate et du tween-20.

Le scellant de plaque:Deux pièces.

Sacs en plastique recouvertables:Un jeu.

Le manuel d'utilisation:Une copie.

Préparations

1Laisser tous les échantillons et les réactifs atteindre la température ambiante et mélanger soigneusement par inversion douce avant utilisation.

2. Préparer le tampon de lavage en diluant le concentré de lavage 20 fois avec de l'eau désionisée. La solution de lavage diluée est stable à température ambiante pendant au moins une semaine.

Procédure d'essai:

1.Marquez les bandes de microtitration à utiliser.

2.Distribuer 100 ul de calibrateur/commandes Distribuer 100 ul de dilution d'échantillon et 10 ul d'échantillon dans les puits respectifs.

3.Couvrir les bandes avec un scellant de plaque. Mélanger doucement en faisant tourner la plaque de microtiter sur un banc plat. Incuber la plaque à 37°C pendant 0,5 heure.

4.Lavez chaque puits 3 fois, 10 secondes à chaque fois (voir procédure de lavage).

5.Dispensez 100 ul de HRPC conjugate à chaque puits.

6.Couvrir les bandes avec un scellant de plaque. Mélanger doucement en faisant tourner la plaque de microtiter sur un banc plat. Incuber la plaque à 37°C pendant 0,5 heure.

7.Lavez chaque puits 3 fois, 10 secondes à chaque fois (voir procédure de lavage).

8- Je vous en prie.Il est recommandé d'injecter 50 ul de chromogène par puits.

9.Donnez 50 ul de chromogène B à chaque puits.

10.Couvrir les bandes d'un scellant de plaque frais, mélanger doucement en faisant tourner la plaque de microtiter sur un banc plat, incuber la plaque à 37°C pendant 15 minutes.

11.Dispenser 50 ul de solution d'arrêt à chaque puits et mélanger complètement.

12. Lire l'absorbance de la plaque dans les 10 minutes (voir procédure de lecture)

Précautions pour les utilisateurs

1. La manipulation doit exclure toute pipette par voie orale. Utilisez uniquement des pipettes à bout jetable pour chaque spécimen.

2Ne mélangez pas les matières de différents lots maîtres. N'utilisez pas les composants du kit après la date de péremption.

3Tous les matériaux doivent être mis à température ambiante avant utilisation.